Estudos estruturais por difração de raios x com fosfolipases a2 em presença de íons com importância funcional

• Processo: 08/00289-2
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2008
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2009
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Biofísica - Biofísica Molecular
• Pesquisador responsável: Marcos Roberto de Mattos Fontes
• Beneficiário: Rafael Junqueira Borges
• Instituição Sede: Instituto de Biociências (IBB). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
• Assunto(s): Inibidores de fosfolipase A2 Difração por raios X Miotoxicidade Fosfolipases A2 Cristalografia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cristalografia | Difração de Raios X | Fosfolipases A2 | Inibidores de fosfolipase A2 | Miotoxicidade | Cristalografia de Macromoléculas

Resumo

Serpentes do gênero Bothrops são responsáveis por mais de 90% dos acidentes ofídicos que ocorrem no Brasil. Uma das principais complicações deste tipo de acidente é a necrose muscular, que está relacionada à ação de fosfolipases A2 e metaloproteases, dois grupos de enzimas presentes no veneno destes animais. Esta complicação não é contornada pela administração do soro antiofídico e, por isso, diversos trabalhos vêm sendo realizados na tentativa de se conhecer os sítios farmacológicos destas toxinas com o intuito de, no futuro, se desenvolver tratamentos complementares à soroterapia. Este projeto de pesquisa tem como objetivo o estudo estrutural de fosfolipases A2 (PLA2s) botrópicas em presença de íons relevantes para a atividade das mesmas, através da técnica de cristalografia de raios X. Recentemente, foi demonstrado que íons, tal como Manganês, Cálcio e outros interferem na atividade biológica de PLA2s. Particularmente, Lys49-PLA2s na presença de íons manganês têm a atividade miotóxica bastante reduzida. A atividade catalítica das PLA2s é dependente da ligação com íons cálcio; no entanto estudos estruturais recentes com a Asp49-PLA2 BthTX-II sugerem um possível mecanismo catalítico independente de cálcio, sendo desta maneira interessante cristalizar esta proteína na presença deste íon. Estudos comparativos entre os resultados obtidos, bem como a comparação destes com outros dados já existentes na literatura, serão realizados na tentativa de melhor compreender as relações estrutura-função destas toxinas. Devido a grande importância das toxinas a serem estudadas, os resultados deste projeto podem trazer importantes conclusões a respeito do sítio farmacológico responsável pela miotoxicidade de PLA2s, bem como das alterações conformacionais que levam à inibição destas.