Caracterizacao funcional de proteinas hipoteticas conservadas da bacteria xylella fastidiosa causadora da clorose variegada dos citros.

• Processo: 03/05822-7
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2003
• Data de Término da vigência: 30 de setembro de 2005
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Bioquímica de Microorganismos
• Pesquisador responsável: Francisco Javier Medrano Martin
• Beneficiário: Henrique Ferreira
• Instituição Sede: Associação Brasileira de Tecnologia de Luz Síncrotron (ABTLuS). Campinas , SP, Brasil
• Assunto(s): Xylella fastidiosa Clorose variegada dos citros Cromatografia de afinidade
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cromatografia De Afinidade | Cvc | Estudos Funcionais | Xylella Fastidiosa

Resumo

O conhecimento do genoma de Xylella fastidiosa foi capaz de sugerir vias metabólicas/biosintéticas possivelmente utilizadas pela bactéria, mas este dado sozinho não é suficiente para se desvendar a biologia deste organismo. Adicionalmente, -40% deste genoma compõe-se de ORFs codificando para produtos desconhecidos, onde maioria possui homólogos encontrados em outros genomas (hipotéticas conservadas). A proposta do presente projeto é, pois a caracterização funcional de produtos codificados por genes hipotéticos conservados de Xf-CVC, bem como determinar se existe algum envolvimentos destes produtos com patogenicidade. O estudo prevê a seleção inicial de cerca de 100 ORFs para clonagem e expressão baseando-se no tamanho dos produtos codificados (300aa +/-200) e inexistência de r homólogos com estrutura já resolvida. Devido à inexistência de metodologias para o estudo de função de proteínas hipotéticas, espera-se obter indícios de função através de análises de interação proteína-proteína utilizando-se sistemas de duplo híbrido e/ou isolamento de complexos protéicos contendo proteínas hipotéticas por cromatografia de afinidade. Pretende-se também desenvolver métodos para a seleção ''instantânea" de transformantes de Xf, utilizando-se microscopia de fluorescência, e a otimização de estudos de localização de proteínas de Xf in situ. (AU)