Caracterizacao de interacoes do dominio citoplasmatico da banda 3 cardiaca humana (ae3) usando o ensaio duplo-hibrido.

• Processo: 00/03792-5
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2000
• Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2004
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Sara Teresinha Olalla Saad
• Beneficiário: Paulo Roberto Moura Lima
• Instituição Sede: Centro de Hematologia e Hemoterapia (HEMOCENTRO). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 96/09825-5 - Alterações funcionais e moleculares de proteínas da membrana eritrocitária nas esferocitoses hereditárias e clonagem do gene da banda 3 em réptil Caiman crocodilus yacare (jacaré do Pantanal), AP.TEM
• Assunto(s): Leveduras Duplo-híbrido Coração
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Banda 3 | Coracao | Duplo Hibrido | Levedura | Trocador De Anions

Resumo

A banda 3 ou trocador de ânions da hemácia desempenha uma variedade de funções biológicas. Seu domínio transmembrana é capaz de realizar a troca CI-/HC03-, e possui aminoácidos envolvidos na remoção celular por envelhecimento. O domínio citoplasmático possui sítios de ligação para proteínas do citoesqueleto, enzimas da via glicolítica, hemoglobina e produtos da oxidação da hemoglobina. Numa visão simplificada da família de genes de trocadores de ânions, a isoforma eritróide e renal é a AE1; a isoforma mais amplamente distribuída nos tecidos é a AE2; e a isoforma cerebral e cardíaca é a AE3. Usando a porção N-terminal da AE3 cardíaca como isca no sistema duplo-híbrido, contra uma biblioteca de coração humano, poderão ser caracterizadas interações da banda 3 com proteínas conhecidas ou não, e obter seus genes clonados. O rastreamento com o duplo-híbrido é uma estratégia atual e vêm sendo aplicada a várias áreas do conhecimento. Proteínas de plantas, animais e vírus têm sido utilizadas como iscas, contra outra proteína, contra uma biblioteca de cDNA ou mesmo contra o genoma de um vírus e conseqüentemente novas proteínas ou interações vêm sendo caracterizadas usando este ensaio genético em leveduras. (AU)