Avaliacao de diferentes sistemas bacterianos para a expressao da proteina oppa de xanthomonas axonopodis pv citri.

• Processo: 01/10702-5
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2002
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2002
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Microbiologia - Biologia e Fisiologia dos Microorganismos
• Pesquisador responsável: Rita de Cássia Café Ferreira
• Beneficiário: Juliano Domiraci Paccez
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Expressão de proteínas
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Expressao De Proteinas | Proteinas Bacterianas

Resumo

O projeto tem como principal objetivo aplicar técnicas de clonagem e expressão de proteínas em diferentes sistemas procarióticos, como parte das atividades realizadas pela equipe de pesquisa no programa de biologia estrutural (SMOLbNET) patrocinada pela FAPESP. O trabalho de iniciação científica prevê a utilização de sistemas que permitam a expressão de proteínas intactas (pKK223~3) ou fusionadas a seqüências heterólogas (pET e pMAL) de modo permitir sua purificação. Como modelo para a aplicação dos sistemas de clonagem será utilizado o gene oppA de Xanthomonas axonopodis pv citri, que codifica para o componente periplasmático, proteína OppA, do mais importante sistema de transporte e captação de oligopeptídeos. A partir da clonagem do gene oppA nos três sistemas de expressão, o aluno deverá ser capaz de avaliar as principais características de cada estratégia, sobretudo aquelas relacionadas com a otimização da expressão e a purificação da proteína alvo. Este trabalho faz parte de um esforço maior do grupo em desenvolver competência na área de biologia estrutural. (AU)