Aplicação da técnica de espectrometria de massas para caracterização do lipidoma em oócitos e embriões bovinos

• Processo: 08/10756-7
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de maio de 2009
• Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2010
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
• Pesquisador responsável: Marcos Nogueira Eberlin
• Beneficiário: Christina Ramires Ferreira
• Instituição Sede: Instituto de Química (IQ). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Assunto(s): Biotecnologia Criopreservação Fertilização in vitro Embrião de animal
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Criopreservação | embrião bovino | fertilização in vitro | fosfolipídeo | lipidoma | triglicerídeo | Biotecnologia

Resumo

Embriões bovinos produzidos por fertilização in vitro (FIV) possuem menor qualidade, menor viabilidade e maior criosensibilidade em relação aos embriões obtidos in vivo. Atualmente, o principal obstáculo para a expansão comercial da FIV no Brasil é a possibilidade de obtenção de taxas de prenhez satisfatórias a partir de embriões de raças zebuínas criopreservados. Estudos salientaram a influência dos lipídeos na fertilidade, no desenvolvimento embrionário e na criosensibilidade de embriões. O objetivo desse projeto é estabelecer o perfil das classes mais abundantes de lipídeos, ou seja, triglicerídeos (TAGs) e fosfolipídeos, em oócitos bovinos imaturos, maturados in vitro, embriões coletados in vivo e embriões produzidos por FIV com ou sem adição de ácido linoléico no meio de cultivo. Os oócitos e embriões coletados terão a zona pelúcida removida em pronase 0,5% e serão estocados em solução de metanol/água 1:1 (v/v) a -80ºC até a análise. Será utilizada a técnica de espectrometria de massas por ionização/dessorção de matriz assistida a laser - tempo de vôo (MALDI-TOF MS), com matriz ácido 2,5-di-hidroxibenzóico (DHB). A coleta de espectros de massas será realizada em equipamento MALDI-TOF (Micromass. Manchester, UK). Os espectros serão processados (MassLynx v.4.0 Waters, Manchester, UK) para caracterização dos lipídeos e análise quimiométrica (Pirouette 3.11, Infometrics Inc, EUA). A caracterização do lipidoma de oócitos e embriões, até então não relatada na literatura, pode se tornar uma importante ferramenta no desenvolvimento de estratégias de criopreservação de embriões bovinos produzidos in vitro. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

LO TURCO, EDSON GUIMARAES; MARTINS FERREIRA SOUZA, GUSTAVO HENRIQUE; GARCIA, JERUSA SIMONE; FERREIRA, CHRISTINA RAMIRES; EBERLIN, MARCOS NOGUEIRA; BERTOLLA, RICARDO PIMENTA. Effect of endometriosis on the protein expression pattern of follicular fluid from patients submitted to controlled ovarian hyperstimulation for in vitro fertilization. Human Reproduction, v. 25, n. 7, p. 1755-1766, JUL 2010. (08/10756-7)

FERREIRA, CHRISTINA R.; SARAIVA, SERGIO A.; CATHARINO, RODRIGO R.; GARCIA, JERUSA S.; GOZZO, FABIO C.; SANVIDO, GUSTAVO B.; SANTOS, LUIZ FERNANDO A.; LO TURCO, EDSON G.; PONTES, JOSE HENRIQUE F.; BASSO, ANDREA C.; et al. Single embryo and oocyte lipid fingerprinting by mass spectrometry. Journal of Lipid Research, v. 51, n. 5, p. 1218-1227, MAY 2010. (08/10756-7)