Frequencia de mutacoes em genes da familia ras pre-neoplasicas e neoplasicas de figado observada em ensaio de carcinogenese quimica de media duracao.

• Processo: 00/03237-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de junho de 2000
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2000
• Área de conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Anatomia Patológica e Patologia Clínica
• Pesquisador responsável: João Lauro Viana de Camargo
• Beneficiário: Andréia Hanada Otake
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina (FMB). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
• Assunto(s): Imuno-histoquímica Transformação celular neoplásica Biologia molecular
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Biologia Molecular | Carcinogenese Quimica | Ensaio Alternativo | Imuno-Histoquimica | Ras

Resumo

O presente projeto tem por objetivo identificar mutações nos éxons 1 e 2 dos genes K-RAS e H-RAS em lesões pré-neoplásicas e neoplásicas de fígado encontradas em ratos Wistar submetidos a protocolo de carcinogênese de médía duração para múltiplos órgãos (ensaio DMBDD). Insere-se em linha de pesquisa do Núcleo de Avaliação Toxicogenética e Cancerígena (TOXICAN), do Departamento de Patologia - Faculdade de Medicina, UNESP Botucatu/SP - para desenvolver e padronizar o ensaio DMBDD no país. Baseado no paradigma "iniciação-promoção" da carcinogênese química, o ensaio DMBDD utiliza grupos de animais controle positivo e negativo da iniciação e da promoção. A iniciação é desencadeada pelo uso sucessivo de cinco agentes genotóxicos, enquanto que a promoção é estabelecida com fenobarbital, reconhecido agente promotor de neoplasias no fígado de roedores. Ao final das 30 semanas que constituem a duração do ensaio, o material é coletado, processado e as lesões identificadas por anatomo-patologista. As alterações genéticas serão avaliadas nas lesões pré-neoplásicas e neoplásicas que se desenvolveram no fígado. As alterações dos oncogenes K-RAS e H-RAS serão avaliadas diretamente pela técnica não-isotópica de PCR-SSCP e indiretamente por imuno-histoquímica, com marcação por anticorpo monoclonal reativo para a oncoproteína p21(ras). (AU)