Efeito de concentracoes crescentes de parecoxibe e de flunixina meglumina, adicionados no cultivo in vitro de embrioes bovinos, na taxa de formacao e de eclosao de blastocistos.

• Processo: 07/04284-2
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2007
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2008
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
• Pesquisador responsável: Marcelo Fábio Gouveia Nogueira
• Beneficiário: Eduardo Montanari Razza
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências e Letras (FCL-ASSIS). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Assis. Assis , SP, Brasil
• Assunto(s): Parecoxibe Blastocisto Técnicas in vitro
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Blastocisto | cultivo in vitro | embrião bovino | Flunixina meglumina | Parecoxibe | Taxa de eclosão | Biotecnologia de Embriões

Resumo

Visto o enorme interesse acerca do incremento das taxas de gestação em bovinos, cresce a busca de técnicas e biotecnologias que consigam maximizar essas taxas para os produtores. No entanto, as produções de embriões - tanto in vivo quanto in vitro - ainda não permitem o controle destas taxas, o que requer estratégias mais eficientes na redução das perdas embrionárias. Estratégias de aumentar a eficácia do reconhecimento materno da gestação, mediante a administração de fármacos capazes de inibir a atividade da enzima cicloxigenase (COX) I e II (Flunixina meglumine) ou especificamente a COX-II (parecoxibe), foram aventadas como potenciais tratamentos para aumentar a taxa de gestação pós-inovulação embrionária. Porém, estudos indicando qual o limiar de embriotoxicidade dos referidos fármacos, ainda não foram adequadamente realizados. O presente trabalho visa avaliar os efeitos dos fármacos flunixina meglumina e parecoxibe, no desenvolvimento dos embriões bovinos durante seu cultivo in vitro até a formação e a eclosão de blastocistos. Oócitos imaturos, provenientes de ovários de vacas de abatedouro, serão aspirados, selecionados e submetidos à maturação in vitro, dividos em duas placas com 6 gotas cada, em meio TCM 199 com bicarbonato contendo 10% de soro fetal bovino, 2 µL/mL de piruvato (solução 100 mM), 75 µg/mL de gentamicina, 20 µg/mL de FSH (Pluset®) e 2 UI/mL de hCG (Profasi®). Após 20 horas de maturação a 39ºC (5% de CO2 em ar) os oócitos maturados serão alocados em meio de fertilização, fertilizados com sêmen previamente descongelado, e incubados durante 10 a 12 horas. Após este período, os prováveis zigotos serão transferidos para o meio TCM 199 com HEPES para o desnudamento em vórtex, e finalmente para o meio de cultivo in vitro. Cada gota deste meio conterá as devidas concentrações de flunixina meglumina (0,14; 1,4; 14; 140 e 1.400 µg/mL) e de parecoxibe (0,09; 0,9; 9; 90 e 900µg/mL), sendo mantidas em cada placa uma gota como grupo controle. Em cada gota (concentrações dos 2 fármacos e respectivo grupo controle), as taxas de clivagem dos embriões, bem como a formação e a eclosão dos blastocistos, serão avaliadas e comparadas 48, 96, 144 e 192 horas após a fertilização. Desta forma, serão caracterizados os efeitos, tóxicos ou não, da flunixina meglumina e do parecoxibe no desenvolvimento de embriões bovinos cultivados in vitro.