Comparacao do proteoma de membrana plasmatica de celulas dendriticas imaturas e maduras obtidas a partir de monocitos de sangue periferico humano.

• Processo: 03/00870-3
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2003
• Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2004
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Química de Macromoléculas
• Pesquisador responsável: Lewis Joel Greene
• Beneficiário: Vitor Marcel Faça
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 98/14247-6 - Center for Research on Cell-Based Therapy, AP.CEPID
• Assunto(s): Espectrometria de massas Proteínas da membrana Biotinilação Células dendríticas
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Biotinilacao | Celulas Dendriticas | Eletroforese Bi Dimensional | Espectrometria De Massa | Proteinas De Membrana | Proteoma Sub Celular

Resumo

As células dendríticas (DCs) são células apresentadoras de antígeno altamente especializadas (APCs), que têm papel essencial na iniciação e controle da resposta citotóxica de células T. DCs imaturas capturam e processam antígenos e DCs maduras apresentam antígenos complexados a moléculas MHC. Para contribuir com o melhor entendimento das funções das DCs, este projeto propõe a caracterização comparativa do proteoma sub-celular de membrana plasmática destas células, nos estágios imaturo e maduro, obtidas a partir de monócitos de sangue periférico humano. A abordagem experimental consistirá em: i) marcação das proteínas de membrana das DCs imaturas e maduras por biotinilação; ii) fracionamento celular por centrifugação; iii) solubilização das proteínas de membrana com surfactantes; iv) obtenção de mapas pela eletroforese bi-dimensional e detecção das proteínas biotiniladas, provenientes da membrana celular e vi) identificação das proteínas diferencialmente expressas por espectrometria de massa e seqüenciamento N-terminal. Esta abordagem irá trazer informações adicionais a respeito dos processos de captura de antígenos, de migração das células dendríticas maduras e demais processos que ocorrem ao nível da membrana plasmática. (AU)