Determinação dos mecanismos de indução de lesões na molécula de DNA pela irradiação com luz UVA

• Processo: 09/52110-9
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2009
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2009
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Molecular e de Microorganismos
• Pesquisador responsável: Carlos Frederico Martins Menck
• Beneficiário: Teiti Yagura
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Dano ao DNA Reparo do DNA Raios ultravioleta Dosímetros
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Analises Densitometricas | Enzimas De Reparo De Dna | Fotoprodutos | Lesoes Oxidativas | Radiacao Uva

Resumo

A radiação UVA é pouco absorvida pela molécula de DNA, mas é capaz de excitar outros cromóforos endógenos que geram lesões de DNA através da produção de espécies reativas de oxigênio. Porém, trabalhos recentes desafiam a hipótese de que a maioria dos danos de DNA induzidos pela radiação UVA sejam mediados por estresse oxidativo. Estes mostram que há uma maior indução de lesões do tipo CPDs após irradiação de culturas de células com luz UVA do que lesões induzidas por espécies reativas de oxigênio. Através do desenvolvimento do sistema Dosímetro Biológico de DNA, foi possível detectar a indução de lesões oxidativas, CPDs e, surpreendentemente, 6-4PPs após a irradiação de amostras de DNA plasmidial em lâmpada de UVA. Desta forma, a proposta do presente trabalho consiste na irradiação de amostras de DNA plasmidial com luz UVA com diferentes abordagens experimentais e na presença de diferentes substâncias para estudar os possíveis mecanismos envolvidos na indução de lesões de DNA por estes comprimentos de onda. A determinação e quantificação dos diferentes tipos de lesões de DNA formadas após as irradiações serão realizadas com a utilização de enzimas de reparo de DNA (glicosilase e endonucleases) que reconhecem e clivam o sítio contendo uma lesão específica. Complementando estas análises, serão realizados ensaios com anticorpos específicos para as lesões CPD e 6-4PP. Portanto, com a realização destas análises bioquímicas pretende-se desvendar se os danos induzidos pela luz UVA na molécula de DNA são gerados por mecanismos indiretos ou se são gerados de maneira direta. (AU)