Construção de uma coleção de mutantes haplóides contendo inserções de mTn3-LacZ

• Processo: 97/05620-2
• Modalidade de apoio: Bolsas no Exterior - Pesquisa
• Data de Início da vigência: 29 de janeiro de 1998
• Data de Término da vigência: 28 de janeiro de 2000
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Molecular e de Microorganismos
• Pesquisador responsável: Paulo Sergio Rodrigues Coelho
• Beneficiário: Paulo Sergio Rodrigues Coelho
• Pesquisador Anfitrião: Michel P. Snyder
• Instituição Sede: Pessoa Física
• Instituição Anfitriã: Yale University, Estados Unidos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cell Cycle Regulation | Cell Morphogenesis | Cyclins | Map Kinase Slt2P | Signal Transduction

Resumo

O objetivo deste projeto é analisar a via de sinalização celular pela proteína kinase C (PKC) - kinase MAP, Slt2p em Saccharomyces cerevisiae. As vias de transdução de sinal pelas kinases MAP são utilizadas por muitos organismos para regular as respostas das células durante a sua diferenciação e crescimento. Estudos genéticos e bioquímicos indicam que a MAPK, Slt2p é necessária para o crescimento celular polarizado em levedura. Resultados recentes de experimentos genéticos e bioquímicos demonstram também que o fator SBF (SCB binding factor) é um alvo de fosforilação pela Slt2p (1,2). O SBF é um complexo heterodimérico composto pelas proteínas Swi6p e Swi4p, que regula a expressão das ciclinas da fase G1: CLN1,2 e PCL1,2. Esses resultados são extremamente interessantes porque evidenciam uma ligação entre a progressão do ciclo celular e a morfogênese em Saccharomyces cerevisiae. O objetivo é avaliar pela utilização de técnicas genéticas e bioquímicas como a Slt2p regula a função do SBF. Por exemplo, como a fosforilação do SBF pela Slt2p altera sua afinidade pelo DNA e/ou regula a ativação da transcrição? A Slt2p estabiliza ou facilita a formação do complexo SBF?. Afim de estabelecer como Slt2p regula a função do SBF planejamos identificar os sítios da Swióp que são alvos da Slt2p. Evidências genéticas sugerem que o SBF pode não ser o único alvo da Slt2p, Portanto serão realizados rastreamentos genéticos para identificar alvos "downstream" da Slt2p. Os resultados deste estudo ajudarão na elucidação dos mecanismos moleculares que governam a diferenciação celular em outros organismos eucarióticos. (AU)