Desenvolvimento e aplicação de uma multiplex-RT-PCR para a detecção de arbovírus brasileiros seguida de Nested-PCR para identificação espécie ou grupo específica

• Processo: 99/08207-4
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de novembro de 1999
• Data de Término da vigência: 31 de outubro de 2003
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Medicina Veterinária Preventiva
• Pesquisador responsável: Luiz Tadeu Moraes Figueiredo
• Beneficiário: Roberta Vieira de Morais Bronzoni
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Bronquite Infecciosa | Diagnostico | Elosa | Nested-Rt-Pcr | Rt-Pcr

Resumo

O diagnóstico viral do BI e rotineiramente realizado pelo Isolamento Viral seguido da identificação por meio do teste de Vírus Neutralização. Tais procedimentos são geralmente demorados e onerosos. O RT-PCR revelou-se um método sensível e específico no detecção do genoma viral deste vírus, no entanto a detecção e diferenciação dos produtos amplificados, realizados pelas técnicas de Eletroforese em gel de agarose, RFLP ou Seqüenciamento torna esse procedimento laborioso e demorado. Assim, no sentido de oferecer métodos de biologia molecular alternativos para o diagn6stico laboratorial do BL o presente projeto tem como objetivo principal desenvolver e aplicar os métodos de RT-PCR e Nested-RT-PCR seguido da detecção imunoenzimática (ELOSA) dos produtos amplificados a partir do RNA viral proveniente de amostras teciduais de aves experimentalmente ou naturalmente infectadas com o VBL diferenciando de estirpes vacinais, alem de avaliar comparativamente a performance destes métodos entre si e com a técnica padrão de Isolamento Viral. (AU)