Expressão e regulação hormonal da fenoloxidase cuticular de pupas Apis mellifera e caracterização do RNAm

• Processo: 00/07670-1
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2000
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2004
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Biologia Geral
• Pesquisador responsável: Marcia Maria Gentile Bitondi
• Beneficiário: Maria Salete Zufelato
• Instituição Sede: Faculdade de Filosofia, Ciências e Letras de Ribeirão Preto (FFCLRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Abelhas Apis mellifera Hormônio juvenil em insetos Profenoloxidase
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Apis Mellifera | Cuticula | Ecdisona | Fenoloxidase | Hormonio Juvenil | Profenoloxidase

Resumo

O desenvolvimento dos insetos holometábolos está sob o controle dos hormônios ecdisteróides e hormônio juvenil (HJ). Os ecdisteróides são responsáveis pela secreção dos componentes da nova cutícula e influenciam o processo de pigmentação do tegumento entre outros eventos do desenvolvimento, enquanto o HJ determina o tipo de muda (larval ou pupal) entre outras funções. A enzima chave no processo de pigmentação é a fenoloxidase (PO), que é detectada na hemolinfa e na cutícula dos insetos. A ativação de sua forma inativa (a profenoloxidase) ocorre em fases específicas do desenvolvimento, podendo também ser desencadeada ou inibida por alterações hormonais. Os objetivos específicos deste projeto de pesquisa são: caracterizar a PO cuticular de pupas Apis mellifera, através de quantificação a 490nm; determinar a Temperatura e o pH de melhor atividade enzimática; determinar o Km em relação ao substrato L-Dopa e o peso molecular da PO cuticular; estudar o controle hormonal da síntese de PO cuticular in vivo e in vitro através de tratamento das pupas com 20-E ou PPN, além de análises microscópicas para observar prováveis alterações celulares; isolar o RNA das células epidérmicas e identificar o RNAm da profenoloxidase. Este trabalho, contribuirá para o entendimento da regulação da pigmentação cuticular, essencial à diferenciação do exoesqueleto. (AU)