Caracterização da interação do fator de início de tradução ELF-2 com mRNA

• Processo: 94/01552-4
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 1994
• Data de Término da vigência: 31 de janeiro de 1997
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Beatriz Amaral de Castilho
• Beneficiário: Eduardo de Oliveira Melo
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Efrina-B2 Aminoácidos Saccharomyces cerevisiae
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Fatores De Iniciacao | S Cerevisiae | Sintese Proteica

Resumo

O fator elF-2 interage com mRNA através de sua subunidade beta. Esta interação é mediada por resíduos localizados na porção carboxi-terminal desta subunidade. O objetivo deste projeto é definir os aminoácidos envolvidos nesta ligação. Através de mutagênese sítio dirigida, e mutagênese generalizada com hidroxilamina, pretende-se obter formas alteradas de beta que tenham abolida sua capacidade de ligar-se a mRNA. Esta ligação será evidenciada tanto in vivo, através da desrepressão de GCN4, como in vitro, em ensaios de ligação de mRNA, marcado radiativamente, por proteínas imobilizadas em filtros (Northwestern blots). (AU)