Inativacao dos genes pil a, pil r, pil s da "xylella fastidiosa".

• Processo: 02/05954-8
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de outubro de 2002
• Data de Término da vigência: 31 de agosto de 2004
• Área de conhecimento: Ciências Agrárias - Agronomia - Fitossanidade
• Pesquisador responsável: Manoel Victor Franco Lemos
• Beneficiário: Luciene Melo Coelho
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias (FCAV). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Jaboticabal. Jaboticabal , SP, Brasil
• Assunto(s): Genes Xylella fastidiosa
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Dna Linear | Genes | Inativacao | Nutantes | Xylella Fastidiosa

Resumo

A bactéria Xylella fastidiosa é responsável pela Clorose Variegada dos Cítros (CVC). A Xylella está associada às doenças em diversas culturas de importância econômica Esta bactéria localiza-se nos vasos xilemáticos das plantas hospedeiras, instalando-se e multiplicando-se. O resultado final é o entupimento dos vasos, a perda de clorofila, o amarelamento, as manchas das folhas e a produção precoce de frutos pequenos e duros, imprestáveis para o consumo. A inativação de genes é usada para adicionar material genético a um gene de forma a influenciar a expressão ou a função deste gene. A maioria das estratégias de inativação de genes utilizada demanda trabalho cuidadoso e demorado já que envolve desde a identificação de gene de interesse, o isolamento, a digestão e a ligação de fragmentos. A utilização de enzimas de restrição para digerir o gene alvo, gene marcador e vetor dificulta bastante a construção, em face das limitações quanto à disponibilidade de sítios de restrição. Este projeto tem como objetivo a obtenção de forma rápida e simples, mutantes de X. fastidiosa com os genes pil A, pil R e pil S interrompidos por um cassete de canamicina, utilizando como estratégia de inativação a fusão de PCR com "primers" intergênicos ou quiméricos para amplificação do cassete de canamicina, contendo em suas extremidades fragmentos dos genes a serem inativados, que será utilizado na forma linear para a transformação da linhagem J1A12. (AU)