| Processo: | 03/03450-5 |
| Modalidade de apoio: | Bolsas no Brasil - Doutorado Direto |
| Data de Início da vigência: | 01 de setembro de 2003 |
| Data de Término da vigência: | 31 de agosto de 2007 |
| Área de conhecimento: | Ciências Biológicas - Microbiologia - Microbiologia Aplicada |
| Pesquisador responsável: | Luis Carlos de Souza Ferreira |
| Beneficiário: | Juliano Domiraci Paccez |
| Instituição Sede: | Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil |
| Assunto(s): | Bacillus subtilis Escherichia coli enterotoxigênica Vacinas Desenvolvimento de vacinas |
| Palavra(s)-Chave do Pesquisador: | Bacillus Subtilis | Cfa/1 | Etec | Lt | Vacinas |
Resumo O presente projeto tem como objetivo principal empregar linhagens geneticamente modificadas de Bacillus subtilis capazes de expressar antígenos de Escherichia coli enterotoxigênica (ETEC), importante agente etiológico da diarréia infantil, como estratégia de imunização oral. O trabalho propõe o domínio de técnicas de manipulação genética de B. subtilis, uma bactéria não patogênica e com potencial probiótico, de forma a permitir a expressão de dois antígenos vacinais: a subunidade B da toxina termo-lábil (LTB) e a subunidade estrutural da adesina CFA/I (CfaB) de ETEC. Os respectivos genes serão clonados e expressos sob controle de promotores induzíveis de B. subtilis e integrados ao DNA cromossômico para estabilização da expressão. As construções a serem feitas priorizarão a expressão intracitoplasmática e a expressão extracelular com ancoramento na parede celular. Tais linhagens recombinantes, uma vez obtidas, serão empregadas na imunização de camundongos e as respostas imunológicas induzidas, tanto sistêmicas como secretoras avaliadas. Será investigado também o grau de proteção contra desafios feitos com linhagens de ETEC em modelo baseado em filhotes recém-nascidos de mães vacinadas. Propõe-se ainda pesquisar alternativas experimentais capazes de aumentar o potencial imunogênico das linhagens construídas, como o uso de adjuvantes de mucosa e expressão de listeriolina, e a utilização de esporos como material imunizante. (AU) | |
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