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Identificação de genes de Aspergillus nidulans cuja a expressão e dependente do complexo MRE 11 durante a resposta celular ao Dano ao DNA

Processo: 03/07491-8
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Doutorado
Vigência (Início): 01 de dezembro de 2003
Vigência (Término): 31 de julho de 2007
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Genética - Genética Molecular e de Microorganismos
Pesquisador responsável:Gustavo Henrique Goldman
Beneficiário:Iran Malavazi
Instituição-sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto (FCFRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
Assunto(s):Aspergillus nidulans

Resumo

O sucesso da proliferação celular é dependente da replicação e segregação do genoma com a mais alta fidelidade. A resposta ao dano ao DNA é um mecanismo protetor que assegura a manutenção da integridade genômica durante a reprodução celular. A resposta ao dano ao DNA consiste de extensivos sistemas de reparo que tratam diretamente do dano ao DNA ou atuam no sistema de vigilância ("checkpoints"), os quais interrompem ou atrasam o ciclo celular. Dentre os componentes celulares que diretamente reparam o dano ao DNA está o complexo Mre11. A coleção de mutantes sensíveis a camptothecimi sca possibilitou a identificação dos genes scaANBSI e mreAmre11 ambos integrantes do complexo mre11 em A. nidulans. Para entender o processamento da resposta ao dano ao DNA nesse fungo, em nosso laboratório está sendo construída uma biblioteca de cDNA a partir de mRNA de uma cultura de A. nidulans induzida com a droga camptothecin. Realizaremos um "screening" diferencial com a técnica de "macroarray" utilizando os "clusters" dessa biblioteca de ESTs induzida de A. nidulans com o objetivo de evidenciar transcritos diferencialmente expressos. Alguns dos genes isolados a partir do "macroarray" serão confirmados em relação ao nível de transcrição utilizando a técnica de RT-PCR em tempo real. Além disso serão construídas linhagens de A. nidulans fusionadas com GFP a fim de localizar intracelularmente a o complexo Mre11 em diferentes "backgrounds" genéticos, bem como a síntese de DNA radioresistente na cepa onde o gene mreAmre11 está deletado (TMRE). (AU)

Publicações acadêmicas
(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)
MALAVAZI, Iran. Caracterização funcional de diferentes componentes das vias metabólicas de resposta ao dano DNA no fungo filamentoso \'Aspergillus nidulan\'. 2007. Tese de Doutorado - Universidade de São Paulo (USP). Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto Ribeirão Preto.

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