Isolamento e caracterização de transcritos sexo-específicos em peixes utilizando a técnica de DDRT-PCR (Differential Display Reverse Transcriptase): modelo inicial para implementação de linha de pesquisa em expressão gênica diferencial

• Processo: 03/11702-4
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Jovens Pesquisadores
• Data de Início da vigência: 01 de dezembro de 2003
• Data de Término da vigência: 11 de junho de 2006
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Animal
• Pesquisador responsável: Adriane Pinto Wasko
• Beneficiário: Adriane Pinto Wasko
• Instituição Sede: Instituto de Biociências (IBB). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 03/06761-1 - Isolamento e caracterização de transcritos sexo-específicos em peixes utilizando a técnica de DDRT-PCR (differential display reverse transcriptase): modelo inicial para implementação de linha de pesquisa em expressão gênica diferencial, AP.JP
• Assunto(s): Peixes Expressão gênica Determinação do sexo animal Perfilação da expressão gênica DNA complementar
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Cdna | Ddrt-Pcr | Diferenciacao Sexual | Display Diferencial | Expressao Genica | Peixes

Resumo

A implementação de estudos de expressão gênica diferencial no Departamento de Morfologia do Instituto de Biociências da UNESP-Botucatu mostra-se extremamente importante para a complementação, fortificação e atualização de suas atuais linhas de pesquisa nas áreas de Biologia Celular e Molecular, Histologia e Embriologia. Neste sentido, a técnica de "display" diferencial (DO), metodologia relativamente simples e de baixo custo para identificação de genes diferencialmente expressos, foi selecionada como modelo para a implementação de estudos de expressão gênica diferencial - através de transcrição reversa de RNA utilizando um "primer" ancorador, seguida de reação em cadeia da polimerase (PCR) do DNA complementar utilizando um "primer" arbitrário, diferenças de expressão gênica entre amostras distintas podem ser visualizadas através de eletroforese em gel de poliacrilamida. Como objeto inicial de estudo, a espécie leporinus macrocephalus, peixe de grande importância econômica e que apresenta um sistema cromossômico de determinação sexual do tipo ZZ/ZW, foi selecionada para a identificação e caracterização de transcritos sexo-específicos. Os resultados configurarão dados extremamente importantes para a compreensão da origem e evolução dos mecanismos de determinação e diferenciação sexual em peixes e, de uma forma geral, em vertebrados. (AU)