Analise molecular e bioquimica da participacao do fator elf5a nas diferentes fases da embriogenese de murinos.

• Processo: 04/01781-7
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2004
• Data de Término da vigência: 28 de fevereiro de 2006
• Área de conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Claudio Miguel da Costa Neto
• Beneficiário: Lucas Tabajara Parreiras e Silva
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Vinculado ao auxílio: 00/11397-9 - Estudo do bloqueio do fator de início de tradução de eucariotos 5A (eiF5A): abordagem estrutural e bioquímica, AP.JP
• Assunto(s): Embriogênese Proteínas recombinantes Expressão gênica diferencial Fator de iniciação 5A em eucariotos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Elf5A | Embriogenese | Expressao Diferencial | Northem Blot | Proteina Recombinante | Westem Blot

Resumo

O fator de inicio de tradução de eucariotos 5A (elF5A) é uma proteína de 18KDa que parece estar envolvida em diferentes eventos bioquímicos e celulares, tais como síntese protéica, transporte núcleo-citoplasmático, entre outros. Existe uma modificação pós-traducional que ocorre unicamente em elF5A, chamada hipusinação, onde um resíduo de lisina é transformado em hipusina por meio de incorporação de um motivo 4amino-2hidroxibutil. Apesar de nas últimas duas décadas estes estudos terem ajudado a elucidar as funções de elF5A tanto na síntese de proteínas quanto no crescimento e diferenciação celular, ainda não foi investigado o seu possível papel durante o desenvolvimento embrionário. Este projeto tem como objetivo analisar a participação da proteína elF5A nas diferentes fases do desenvolvimento embrionário de camundongos. Para atingir tal objetivo utilizaremos diferentes estratégias moleculares e bioquímicas, tais como clonagem, ensaios de Northern blot, purificação da proteína recombinante, produção de anticorpos anti-elF5A e ensaios de Western blot. A presença da proteína elF5A ou de seu mRNA será averiguada desde a fase de pós-implantação uterina até o período pré-nascimento. O fator elF5A é uma proteína altamente conservada durante a evolução, e estes estudos certamente vão ajudar a esclarecer o seu possível papel na diferenciação celular de embriões de mamíferos. (AU)