Expressão imunohistoquimica da isoforma neuronal da sintase do oxido nitrico no neocortex cerebral humano normal e em displasias corticais

Autor(es)

Cesar Augusto Bueno Zanella

• Tipo de documento: Dissertação de Mestrado
• Imprenta: Campinas, SP.
• Instituição: Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Faculdade de Ciências Médicas
• Data de defesa: 2002-01-24

Membros da banca

Antonio Roberto Martins; Jose Luiz Donato; Francesco Langone

• Orientador: Antonio Roberto Martins

Resumo

A ontogênese do cérebro ocorre através de um programa coordenado de eventos celulares, entre eles, divisão celular, migração neuronal, morte celular seletiva e diferenciação. A interrupção desses processos, ou de um deles, pode provocar anormalidades da arquitetura do córtex cerebral em desenvolvimento e de suas propriedades eletrofisiológicas. Uma manifestação de malformação relacionada ao desenvolvimento cortical é a epilepsia. Entre as lesões estruturais do SNC que causam epilepsia destacam-se as displasias corticais. No SNC, o NO é um importante neurotransmissor e participa da regulação de diversas funções cerebrais. O NO é sintetizado após ativação ou indução da enzima NOS, e no córtex cerebral ele é produzido sob demanda pela nNOS. No entanto, quando presente em altas concentrações, o NO, assim como o glutamato, podem iniciar uma cascata neurotóxica. Pode, também, ter papel importante na fisiopatologia da epilepsia. No presente trabalho, realizamos um estudo imunohistoquímico para mostrar a expressão da nNOS em displasias corticais e no córtex cerebral humano normal. Padronizamos um método para recuperação da antigenicidade de secções de tecido de córtex cerebral humano fixados em formalina e embebidos em parafina com tratamento em forno de microondas em tampão Tris-HCI 50 mM pH 9.5 , e que foi utilizado nos experimentos imunohistoquímicos. Os córtices displásicos mostraram nNOS-IR em neurônios por toda a espessura do córtex, om predomínio em duas camadas que correspondem às camadas III e V. A intensidade de marcação foi variável e com predomínio de marcação citoplasmática, embora alguns neurônios mostraram marcação nuclear. Fibras com varicosidade em toda espessura cortical apresentaram intensa nNOS IR. No córtex cerebral humano normal, neurônios nNOS imunorreativos foram encontrados, preferencialmente, nas camadas mais profundas da substância cinzenta e na substância branca. A camada I não mostrou neurônios nNOS imunorreativos. A nNOS-IR de corpos celulares neuronais teve predomínio de marcação citoplasmática. Um número expressivo de fibras apresentaram nNOS-IR por toda a espessura do córtex. Os tecidos displásicos utilizados em nossos estudos estão associados com epilepsia farmacologicamente intratável. Assumindo que a nNOS-IR detectada nos neurônios corresponda à forma cataliticamente ativa da nNOS, nós sugerimos que a liberação do NO por estes neurônios poderia ativar neurônios alvo aditivamente provocando uma hipersincronização, e eventualmente disparando uma descarga epiléptica (AU)

• Processo FAPESP: 99/09705-8 - Expressao de componentes do sistema no-ergico durante o desenvolvimento hipocampal humano e em displasias corticais.
• Beneficiário: Cesar Augusto Bueno Zanella
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado