Caracterização da microbiota e efeito do preparo químico-mecânico e da medicação intracanal na redução de microrganismos, endotoxinas e citocinas pró-inflamatórias em dentes com insucesso do tratamento endodôntico e presença de lesão periapical

Autor(es)

Marlos Barbosa Ribeiro

• Tipo de documento: Dissertação de Mestrado
• Imprenta: Piracicaba, SP.
• Instituição: Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Faculdade de Odontologia de Piracicaba
• Data de defesa: 2015-06-02

Membros da banca

Brenda Paula Figueiredo de Almeida Gomes; Fabíola Bastos de Carvalho; Alexandre Augusto Záia

• Orientador: Brenda Paula Figueiredo de Almeida Gomes; Caio Cezar Randi Ferraz

Resumo

O conhecimento da comunidade microbiana e do seu potencial antigênico é importante para o entendimento da patogênese da periodontite apical em dentes endodonticamente tratados. Os objetivos do presente estudo foram: 1) Caracterizar a microbiota associada ao insucesso endodôntico através do teste bioquímico, Nested PCR e sequenciamento parcial do gene 16S rRNA; 2) Quantificar endotoxinas (LPS) por meio do teste Limulus Amebocyte Lysate (LAL) e citocinas pró-inflamatórias IL-1?, IL-1?, TNF-? e PGE2 através do ensaio imunoenzimático (ELISA), correlacionando-as com aspectos clínicos e radiográficos dos pacientes; 3) Avaliar o efeito do preparo químico-mecânico (PQM) e medicação intracanal (MIC) na redução de microrganismos, LPS e de citocinas pró-inflamatórias. Foram coletadas amostras do conteúdo endodôntico de 20 dentes unirradiculares antes (C1), após o PQM (C2), após o uso de EDTA 17% (C3) agitado com ultrassom, e após a MIC (C4). Utilizaram-se materiais estéreis e/ou apirogênicos e técnicas assépticas durante as coletas. Após o processamento laboratorial das amostras, os dados foram tabulados e analisados pelos testes estatísticos Qui-quadrado, Correlação de Spearman e ANOVA (Tukey-Kramer). Os resultados apontaram a presença de uma microbiota mista contendo bactérias Gram positivas e Gram negativas. Quatro diferentes filos foram identificados: Actinobacteria, Firmicutes, Fusobacteria e Proteobacteria. Enterococcus faecalis foi a espécie mais prevalente, identificada fenotipicamente (19/158) e genotipicamente (42/158). O sequenciamento conseguiu identificar 10,12% das amostras em nível de gênero e 89,88% em nível de espécie, enquanto que o teste bioquímico identificou 13,29% e 51,26%, respectivamente. As bactérias mais prevalentes identificadas por Nested PCR foram: Enterococcus faecalis (97,5%), seguido de Porphyromonas gingivalis (88,75%), Fusobacterium nucleatum (56,25%) e Aggregatibacter actinomycetemcomitans (37,5%). O PQM reduziu bactérias em 96,69% (p<0,05), com percentual de redução para Clorexidina (CLX) 2% gel em 99,3% e para NaOCl 6% em 92,1% (p>0,05). O EDTA 17% somente mostrou efeito complementar na redução bacteriana no grupo do NaOCl 6% (p<0,05). Apenas a CLX 2% gel foi efetiva na redução de endotoxinas comparado ao NaOCl 6% e EDTA 17% (P<0,05). O PQM, independentemente da substância química utilizada, foi efetivo na redução dos níveis das citocinas pró-inflamatórias Il-1? (88,14%), Il-1? (89,33%), TNF-? (89,85%) e PGE2 (48,60%) (p<0,05). A MIC não mostrou efeito aditivo na redução de bactérias e citocinas pró-inflamatórias em ambos os grupos (p<0,05); e somente apresentou ação sobre LPS no grupo Ca(OH)2 + CLX 2% gel (p<0,05). Houve correlação positiva ente bactérias, LPS, citocinas pró-inflamatórias e os aspectos clínicos e radiográficos dos pacientes (P<0,05). Conclui-se que o PQM apresentou efeito significante na redução do conteúdo infeccioso de canais radiculares de dentes com insucesso do tratamento endodôntico, enquanto que a MIC não mostrou efeito aditivo significante na redução desses níveis (AU)

• Processo FAPESP: 12/23697-4 - Diversidade microbiana e quantificação de endoxinas e citocinas pró-inflamatórias em infecções endodônticas secundárias/persistentes com lesões periapicais
• Beneficiário: Marlos Barbosa Ribeiro
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado