Caracterização biofísica de componentes de um complexo essencial para a formação da parede bacteriana

Autor(es)

Mayara Mayele Miyachiro

• Tipo de documento: Tese de Doutorado
• Imprenta: Campinas, SP.
• Instituição: Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Instituto de Biologia
• Data de defesa: 2018-01-03

Membros da banca

Andréa Dessen; Juliana Helena Costa Smetana; Andre Luís Berteli Ambrosio; Ana Carolina de Mattos Zeri; Gustavo Fernando Mercaldi

• Orientador: Andréa Dessen

Resumo

As interações entre proteínas desempenham papéis biológicos importantes nas células, como no caso da biossíntese do peptideoglicano (PG), maior componente da parede celular bacteriana e responsável por definir a morfologia e proteger a célula do estresse causado pela alta pressão osmótica intracelular presente tanto em bactérias Gram-negativas como Gram-positivas. A síntese do PG é um processo dinâmico e altamente complexo, consistente de muitos passos de síntese que são orquestrados por diferentes enzimas localizadas em diferentes espaços na célula. As ligases Mur (MurC a MurF) são as proteínas responsáveis por catalisar a síntese dos precursores de PG no citoplasma juntamente com as proteínas MurG e MraY, as quais também estão relacionadas com a síntese dos precursores do PG na membrana, lipídeo I e lipídeo II, respectivamente. Esse grupo de proteínas são essenciais para a sobrevivência da bactéria e são encontradas somente em células de organismos procariota, deste modo, tornando-se alvos potenciais para o desenvolvimento de novos antibióticos. No presente trabalho foi realizada a expressão e purificação de MraY de Streptococcus pneumoniae, proteína integral de membrana, e foi analisada a sua possível interação com a enzima MurF. Existem muitas evidências sobre a formação de complexos entre essas proteínas, no entanto este trabalho descreve de forma inédita a interação direta entre as ligases Mur de Streptococcus pneumoniae, as quais formam um mega-complexo em solução. Também observamos que a interação entre essas proteínas está fortemente relacionada com a presença dos seus estados oligoméricos. Outro achado inédito é a habilidade de MurG de se auto associar em diferentes espécies, dependendo da concentração de detergente em solução, representando um processo dinâmico, importante para a montagem do mega-complexo entre as ligases Mur, uma vez que a interação entre essas proteínas também foi observada neste estudo. Assim, a formação do mega-complexo pode ser explorada como um mecanismo regulatório espacial e temporal da síntese do peptideoglicano (AU)

• Processo FAPESP: 13/02451-0 - Caracterização estrutural de componentes de um complexo essencial para a formação da parede bacteriana
• Beneficiário: Mayara Mayele Miyachiro
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado Direto