A importância das peptidases parasitárias no fornecimento de aminoácidos em promastigotas de Leishmania (Leishmania) infantum

Autor(es)

Thiago Fidelis Ferrão

• Tipo de documento: Dissertação de Mestrado
• Imprenta: São Paulo.
• Instituição: Faculdade de Medicina (FM/SBD)
• Data de defesa: 2020-07-16

Membros da banca

Heitor Franco de Andrade Junior; Selma Giorgio; Roberto Mitsuyoshi Hiramoto; Patrick Jack Spencer

• Orientador: Heitor Franco de Andrade Junior

Resumo

A leishmaniose visceral (LV) é uma doença amplamente distribuída no Brasil e no mundo, com alta morbidade e mortalidade. No Brasil, é causada pela espécie Leishmania (L.) infantum com transmissão vetorial através de fêmeas de Lutzomyia longipalpis. O parasito apresenta duas formas em seu ciclo de vida, as promastigotas presentes em insetos vetores e as amastigotas, presentes em células de mamíferos. A nutrição do parasito depende de aminoacidos obtidos por interações com o hospedeiro. Diferentes peptidases já foram documentadas no gênero Leishmania, com quatro grupos de acordo com o sitio ativo. Neste trabalho, avaliamos o papel de peptidases parasitárias em processos nutricionais na sobrevivência e multiplicação de promastigotas de L .(L.) infantum. Promastigotas foram cultivadas em meio padrão (MP199). O número de promastigotas foi acompanhado diariamente, e no 3 dia de permanencia em cultura os parasitos e o meio foram analisados em relação a sua composição. Os dados obtidos foram utilizados como referência para padronização das técnicas analíticas posteriormente empregadas nos parasitos obtidos de meios ricos em aminoacidos livres (MRA) e rico em proteina (MRP) e seus sobrenadantes de cultura. A comparação entre os parasitos mantidos em MRA e MRP demontrou uma maior concentração de proteinas em MRP 26,22 Micro Gramag/mL em relação a MRA 10,71 Micro Grama/mL. As alterações morfológicas mostraram maior espessamento de glicocálice em promastigotas com maior atividade proteolítica obtidas de MRP, detectada com substratos proteicos marcados com fluorocromo FITC. Os dados aqui obtidos sugerem que as peptidases parasitárias têm atividades nutricionais e meios contendo proteínas em sua composição levam a alterações parasitarias induzindo a ação de peptidases e modificações da superfície do parasito para permitir maior facilidade do processamento destas moléculas e aquisição de aminoácidos, uma visão diferente da função destas enzimas possibilita um melhor entendimento do metabolismo parasitário e sua disponibilidade como alvo de novas drogas (AU)

• Processo FAPESP: 16/15738-3 - A importância das proteases parasitarias no fornecimento de aminoácidos essenciais em promastigotas de Leishmania (Leishmania) infantum
• Beneficiário: Thiago Fidelis Ferrão
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado