Estudo da expressão das proteínas STAT e SOCS no desenvolvimento da doença pulmonar obstrutiva crônica: comparação entre a resposta imunológica local e sistêmica

Autor(es)

Juliana Dias Lourenço

• Tipo de documento: Tese de Doutorado
• Imprenta: São Paulo.
• Instituição: Universidade de São Paulo (USP). Faculdade de Medicina (FM/SBD)
• Data de defesa: 2021-01-26

Membros da banca

Fernanda Degobbi Tenorio Quirino dos Santos Lopes; Alessandra Choqueta de Toledo Arruda; Milton de Arruda Martins; Iolanda de Fátima Lopes Calvo Tibério

• Orientador: Fernanda Degobbi Tenorio Quirino dos Santos Lopes

Resumo

Introdução: A diferenciação das células TCD4+ para os diferentes subtipos é mediada pela sinalização das proteínas transdutoras de sinais e ativadoras de transcrição (STAT) e das proteínas supressoras da sinalização de citocinas (SOCS). Na doença pulmonar obstrutiva crônica (DPOC), há o envolvimento dos subtipos T helper (Th)1, Th17 e T reguladora (Tregs). Entretanto, o desequilíbrio entre as respostas pró e anti-inflamatórias Th17 e Treg é descrita como um mecanismo fundamental no desenvolvimento e progressão da doença. Dessa forma, o objetivo desse estudo foi avaliar a expressão das proteínas STAT e SOCS envolvidas na diferenciação das células TCD4+, principalmente para os subtipos Th17 e Treg, no desenvolvimento da DPOC comparando a resposta local e sistêmica. Métodos: Foram coletadas amostras de tecido pulmonar e sangue periférico de 24 pacientes submetidos à ressecção pulmonar, divididos em dois grupos: Grupo Fumantes Não Obstrutivos (FNO) e DPOC estágios I e II. Para as avaliações realizadas no sangue periférico, foi incluído um terceiro grupo composto por 14 pacientes com DPOC estágios III e IV. A expressão gênica para SOCS1 e 3, STAT1, 3 e 5, Retinoic-acid-related orphan receptor (RORyT), Forkhead box p3 (Foxp3), T-box-expressed-in-T-cells (T-bet), Interleucinas (IL)-6, 17, 10 e Fator de transformação do Crescimento (TGF)-beta, foi avaliada em amostras de tecido pulmonar e leucócitos totais do sangue através da técnica de PCR em tempo real. A expressão das proteínas SOCS1 e 3, STAT1, 3 e 5 totais e fosforiladas foi avaliada por Western Blotting nos mesmos compartimentos. Adicionalmente, foram avaliados os níveis de IL-6, 10, 17, 12, Interferon-gama (IFN-y) e TGF-beta no tecido pulmonar e plasma sanguíneo por ELISA. Resultados e Discussão: Em amostras de tecido pulmonar, foi observado o aumento da expressão gênica de STAT1 e 3, RORyt, Foxp3, IL-6, TGF-beta e aumento dos níveis de IL-6, além da diminuição da expressão da proteína pSTAT5 e da razão pSTAT5/STAT5 em pacientes com DPOC I e II. Enquanto na resposta sistêmica foi observado aumento da expressão gênica de STAT1 e 3 nos grupos DPOC III e IV comparado aos demais e aumento de T-bet, RORyt, IL-6, TGF-beta e expressão da proteína STAT3 total no grupo DPOC III e IV comparado ao grupo DPOC I e II. O aumento dos níveis de IL-6 no plasma sanguíneo foi observado no grupo DPOC I e II comparado ao grupo FNO. Além disso, foi demonstrado aumento na expressão gênica de STAT5 no grupo DPOC III e IV, embora tenha havido uma diminuição na expressão de Foxp3 no grupo DPOC I e II, acompanhada de diminuição dos níveis de IL-10 no grupo DPOC III e IV em comparação aos indivíduos com DPOC I e II. Adicionalmente, a análise da expressão das proteínas SOCS demonstrou somente o aumento da expressão gênica de SOCS3 em tecidos de pacientes com DPOC I e II, e leucócitos de pacientes com DPOC III e IV comparado aos demais. Conclusões: Observamos diferenciação para resposta Th17 nas amostras de tecido pulmonar desde os estágios iniciais da DPOC, enquanto na resposta sistêmica essas alterações acontecem em estágios mais graves. Entretanto, a sinalização intracelular para a resposta Treg parece variar dependendo do compartimento analisado, com diminuição de IL-10 em estágios avançados da doença, reforçando a ideia de haver uma falha na atividade de Treg no desenvolvimento e progressão da DPOC (AU)

• Processo FAPESP: 16/21408-6 - O papel das proteínas socs e stats na diferenciação das células tcd4+ naive no desenvolvimento da doença pulmonar obstrutiva crônica: comparação entre a resposta imunológica local e sistêmica
• Beneficiário: Juliana Dias Lourenço
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado