Análise proteômica da película adquirida formada sobre resinas compostas experimentais contendo ou não carga e/ou inibidores de proteases: estudo in situ

Autor(es)

Vinicius Taioqui Pelá

• Tipo de documento: Dissertação de Mestrado
• Imprenta: Bauru.
• Instituição: Universidade de São Paulo (USP). Faculdade de Odontologia de Bauru (FOB/SDB)
• Data de defesa: 2017-05-19

Membros da banca

Marilia Afonso Rabelo Buzalaf; Daniela Rios Honório; Rafael Rodrigues Lima; Juliano Pelim Pessan

• Orientador: Marilia Afonso Rabelo Buzalaf

Resumo

Na cavidade oral, qualquer superfície exposta é propensa à formação da película adquirida (PA), sendo considerada um filme orgânico, livre de bactérias que se forma in vivo como resultado da adsorção seletiva de proteínas e glicoproteínas salivares às superfícies solidas que estão expostas ao meio bucal. O objetivo deste trabalho será avaliar a influência da adição ou não de carga (vidro de bário alumina silicato e sílica) e/ou de inibidores de proteases (EGCG ou CHX) a resinas compostas experimentais no perfil proteico da PA formada sobre estes espécimes, utilizando estratégias proteômicas quantitativas livres de marcadores. Foram preparadas 324 amostras de esmalte bovino (6x6x2mm), foi feita uma cavidade no centro de 4x4mm, a qual foi preenchida com resinas experimentais. As amostras foram divididas em 6 grupos de 54 espécimes cada, de acordo com os grupos experimentais: Sem carga, sem inibidor (NF-NI); carga, sem inibidor (F-NI); sem carga e CHX (NF-CHX); carga e CHX (F-CHX); sem carga e EGCG (NF-EGCG); carga e EGCG (F-EGCG). Nove adultos jovens de ambos os gêneros paticiparam, usando um aparelho mandibular removível (BISPM - Bauru in situpellicle model) com duas amostras de cada grupo. O experimento foi conduzido por 9 dias consecutivos, durante a manhã por 120 minutos. A PA foi obtida através da ajuda do papel filtro de eletrotodo, umidecido em 3% de ácido cítrico. A película coletada, foi processada por LC-ESI-MS/MS. Os espectros MS/MS obtidos foram confrontados com bases de dados de proteínas humanas (SWISS-PROT). A quantificação livre de marcadores foi feita utilizando o software PLGS. A diferença de expressão entre os grupos foi expressa como p<0.05 para as proteínas down-regulated e 1-p>0.95 para as proteínas up-regulated. Um total de 140 proteínas foram identificadas na PA. Destas, 16 foram encontradas em comum em todos os grupos, dentre elas muitas proteínas típicas da PA, tais como, duas isoformas de Basic salivary proline-rich protein, Cystatin-S, Cystatin-AS, Cystatin-SN, Histatin-1, Ig alpha-1 chain C region, Lysozyme C, Mucin-7, Proline-rich protein 4, Protein S100- A9, Salivary acidic proline-rich phosphoprotein ½, Statherin e Submaxillary gland androgen-regulated protein 3B. O número total de proteínas identificadas em cada grupo foi 31, 51, 18, 38, 106 and 54 para NF-NI, F-NI, NF-CHX, F-CHX, NF-EGCG e F-EGCG, respectivamente. A respectiva quantidade de proteínas exclusivas de cada grupo foi 6, 14, 1, 6, 51 e 5. A maioria das proteínas que não são comumente descritas na PA e que tem funções distintas no organismos, estando envolvidas no metabolismo, sinalização celular, adesão celular, divisão celular, transporte, síntese proteica e degradação foram encontradas no grupo NF-EGCG. Estes resultados demonstram que houve uma diferença no perfil preteico da PA, devido à composição das resinas experimentais, além de oferecer informações importantes sobre o desenvolvimento de materiais restauradores com componentes que podem aumentar a proteção na cavidade oral. (AU)

• Processo FAPESP: 14/25599-5 - Análise proteômica da película adquirida formada sobre resinas compostas experimentais contendo ou não carga e/ou inibidores de proteases
• Beneficiário: Vinícius Taioqui Pelá
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado