Padrão de expressão e mecanismos de regulação dos genes das hemoglobinas na próstata

Autor(es)

Isabella Barbutti

• Tipo de documento: Tese de Doutorado
• Imprenta: Campinas, SP.
• Instituição: Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Instituto de Biologia
• Data de defesa: 2020-10-14

Membros da banca

Hernandes Faustino de Carvalho; Alexandre Bruni Cardoso; Luciana Bolsoni Lourenço; Murilo Vieira Geraldo; Vanessa Morais Freitas

• Orientador: Hernandes Faustino de Carvalho

Resumo

Os genes da alfa (HBA) e beta-globina (HBB) estão organizados em clusters situados em diferentes cromossomos e eles são comumente estudados em células eritróides, onde sua expressão é estequiométrica e a regulação gênica é finamente regulada. Na literatura há descrição de expressão de hemoglobinas em diversos outros tecidos, sendo que alguns desses trabalhos esbarram na questão da regulação gênica ou da funcionalidade das proteínas. Trabalhos anteriores de nosso laboratório identificaram a expressão de hemoglobinas na próstata ventral de roedores adultos castrados ou submetidos à dieta normolipídica baseada em banha de porco. Além disso, dados da literatura demonstraram atividade do promotor proximal da HBG humana em células p63+ da próstata de ratos e em algumas linhagens humanas de próstata. A partir desses dados, foi de nosso interesse estudar em quais condições os genes das hemoglobinas são expressos na próstata e verificar se sua regulação gênica é similar àquela encontrada em células eritróides. E, como a expressão de hemoglobinas parece estar correlacionada com um estado de indiferenciação de células epiteliais, também decidimos verificar se há correlação entre a expressão desses genes e a progressão tumoral de próstata. Para isso, caracterizamos a expressão de hemoglobinas e a localização subcelular das proteínas em linhagens celulares de próstata humana normais ou tumorais, cultivadas em 2D ou 3D, e tratadas com andrógenos. Também utilizamos a próstata de camundongos submetidos a diferentes estímulos androgênicos, obtidos através de castração e/ou reposição hormonal, e de animais idosos. Concluímos que células epiteliais normais da próstata apresentam maior expressão de hemoglobinas do que as células tumorais e que a sinalização de diidrotestosterona (DHT) não altera a expressão de hemoglobinas in vitro ou in vivo. A linhagem RWPE1 apresenta expressão basal de HBA2, HBA1 (cluster alfa) e HBE (cluster beta). Há aumento da expressão de HBA com o cultivo tridimensional dessa linhagem, acompanhado de alteração na localização subcelular da proteína correspondente em algumas células. As hemoglobinas embriônicas são as únicas do cluster ? expressas, tanto in vivo (Hbb-by na próstata de camundongos idosos) como in vitro (mRNA e proteína da HBE em RWPE1). A expressão de hemoglobinas na próstata não é regulada de maneira similar à de eritrócitos. As flutuações de expressão encontradas na linhagem RWPE1 também não são explicadas por fatores intrínsecos do tecido prostático (estímulo por DHT ou expressão de p63) nem por outros mecanismos (sinalização da matriz extracelular ou hipóxia), embora o gene HBA tenha expressão aumentada no cultivo 3D. (AU)

• Processo FAPESP: 16/06543-4 - Caracterização do padrão de expressão e aspectos do mecanismo de regulação dos genes das globinas na próstata
• Beneficiário: Isabella Barbutti Gonçalves
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado