Texto completo
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| Autor(es): |
Mariana Crotti Franco Grandi
Número total de Autores: 1
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| Tipo de documento: | Tese de Doutorado |
| Imprenta: | Campinas, SP. |
| Instituição: | Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Instituto de Biologia |
| Data de defesa: | 2021-12-17 |
| Membros da banca: |
Paulo Mazzafera;
José Francisco de Carvalho Gonçalves;
Ricardo Alfredo Kluge;
Sara Adrián López de Andrade;
Pedro Araújo
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| Orientador: | Paulo Mazzafera |
| Resumo | |
Diversas espécies do gênero Pilocarpus Vahl são nativas do território brasileiro. Popularmente conhecidas como jaborandi, elas apresentam, dentre outros metabólitos secundários, o alcaloide pilocarpina. A pilocarpina, de ação farmacológica, possui alto valor econômico, sendo extraída e comercializada no Brasil a partir de áreas cultivadas ou programas de colheita sustentável. Não há até o presente momento a definição dos genes atuantes na rota de biossíntese de pilocarpina, o que traria ganhos em trabalhos futuros para o aumento da quantidade deste alcaloide em jaborandi. Dessa forma, o presente trabalho teve como objetivo elencar genes que possam atuar na rota de biossíntese de pilocarpina. Para isso, foram realizados estudos com o intuito de alterar a concentração dos alcaloides em jaborandi, além de estudos no âmbito da proteômica e transcritoma, em que folhas de duas espécies de jaborandi (P. spicatus e P. microphyllus) foram utilizadas ao longo do trabalho por apresentarem concentrações discrepantes do alcaloide. O foco das buscas foi para enzimas que pudessem atuar na desaminação dos aminoácidos L-histidina e L-treonina (possíveis precursores) e iniciar a via de biossíntese de pilocarpina, ou para enzimas que pudessem atuar dentro da via, tendo como principais alvos as enzimas CYP450 que são conhecidas por estarem envolvidas em diversas vias de metabólitos secundários. Os dados de proteômica do presente trabalho retornaram o total de 4.168 proteínas que foram analisadas e classificadas em seus respectivos processos biológicos. A partir dos dados de transcritoma foi realizada a montagem de novo das reads sequenciadas e realizadas as análises para a obtenção dos genes diferencialmente expressos entre as duas espécies estudadas, que somaram o total de 13.497 sequências. Destas, 7.777 foram mapeadas e verificadas com o intuito de encontrar genes participantes da via de biossíntese de pilocarpina. Enzimas como treonina amônia-liase e fenilalanina amônia-liase foram encontradas nos dados sequenciados, podendo atuar no catabolismo dos aminoácidos precursores da via de alcaloides em jaborandi. Outros 45 transcritos foram alvos do presente estudo por terem sido mapeados como enzimas CYP450. Diversas CYP450 vistas nos dados de RNAseq de jaborandi já foram descritas em outros trabalhos atuando em vias de biossíntese de diferentes alcaloides. O presente trabalho traz, portanto, um banco de dados de genes e proteínas de duas espécies de jaborandi com indicações para as enzimas que poderiam atuar na via de biossíntese de pilocarpina e dos demais alcaloides em jaborandi e que servirão de base para trabalhos futuros (AU) | |
| Processo FAPESP: | 14/16488-5 - Estabelecimento da rota de biossíntese de pilocarpina em jaborandi através do uso da variabilidade genética e técnicas bioquímicas e moleculares |
| Beneficiário: | Mariana Crotti Franco |
| Modalidade de apoio: | Bolsas no Brasil - Doutorado |