Potenciais marcadores em fibroblastos e vesículas exracelulares de leucoplasia oral podem antecipar a transformação maligna para carcinoma espinocelular oral

Autor(es)

Jamile de Oliveira Sá

• Tipo de documento: Tese de Doutorado
• Imprenta: Piracicaba, SP.
• Instituição: Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Faculdade de Odontologia de Piracicaba
• Data de defesa: 2021-11-26

Membros da banca

Adriana Franco Paes Leme; André Zelanis Palitot Pereira; Vanessa Morais Freitas; Patricia Pintor dos Reis; Márcio Ajudarte Lopes

• Orientador: Adriana Franco Paes Leme

Resumo

O carcinoma espinocelular (CEC) oral é a neoplasia maligna mais comum da região de cabeça e pescoço, com 377.713 novos casos estimados em 2020 (Globocan, 2020). Apesar dos avanços em pesquisas e terapias não houve melhora significativa nas taxas de sobrevida, estimando-se que apenas 50% dos pacientes sobrevivem após cinco anos do diagnóstico. Portanto, o diagnóstico precoce e o tratamento das condições que apresentam risco de se transformar em câncer, como a leucoplasia oral (LO), é fundamental para aumentar a sobrevida e melhorar a qualidade de vida dos pacientes. Nesse contexto, é urgente a necessidade de identificar marcadores indicativos de transformação maligna para auxiliar no diagnóstico e prognóstico, bem como na orientação sobre as decisões de tratamento. A comunicação entre as células no microambiente pré- e tumoral (MT) é decisiva para efetivar a progressão do tumor e os fibroblastos são uma das principais células envolvidas nesse processo, chamados fibroblastos associados ao câncer (do inglês CAF - carcinoma-associated fibroblasts). As vesículas extracelulares (VEs) liberadas por CAFs são capazes de modular um MT fibrótico e imunossupressor, favorável ao crescimento, invasão e metástase. Entretanto, pouco se sabe sobre a sinalização promovida por meio das VEs liberadas pelos fibroblastos durante o processo de malignização. Dessa forma, para identificar proteínas associadas à transição da LO para CEC oral, esse estudo caracterizou as populações de fibroblastos isolados de tecido controle não maligno (NAFs), leucoplasia oral (LAFs) e CEC oral (CAFs) e comparou o perfil proteômico das células e das suas VEs empregando a proteômica baseada em espectrometria de massas. Inicialmente foi realizada caracterização das células por marcadores de fenótipo por RT-qPCR, revelando que os LAFs mostraram expressão diminuída do marcador apCAF SLPI e os CAFs apresentam assinatura miofibroblástica, com expressão diferencial de ACTA2+, POSTN+, TAGLN+, PDPN+, THY1-, CXCL12- e SLPI-. As VEs foram analisadas por tamanho e número por análise de rastreamento de nanopartículas indicando um tamanho médio de 116,0 (±18,1) nm. Foram identificadas 1.529 proteínas no conjunto de células e 756 no conjunto de VEs, sendo 19 e 46 estatisticamente significantes, respectivamente. O agrupamento de pacientes, baseando-se no padrão de abundância das proteínas de células e VEs, revelou características clínicas associadas com a malignização e progressão tumoral. Além disso, o agrupamento da abundância proteica permitiu o reconhecimento de três padrões distintos, caracterizados principalmente por vias que modulam o sistema imune e regulam o citoesqueleto de actina e a migração celular. Três proteínas em células e uma proteína em VEs foram diferenciais entre LAF e CAF em relação a NAF. Particularmente, o aumento de abundância de AK1 em LAF-cel e CAF-cel apresenta correlação significativa com o tamanho das lesões de LO e a diminuição de abundância de TNFRSF11B em LAF-ve e CAF-ve apresenta associação com a ausência de variação anormal do tamanho do núcleo dos casos de LO e ausência de invasão angiolinfática dos casos de CEC oral. Dessa forma, essas proteínas são candidatas potenciais para antecipar a transição para malignização, podendo auxiliar no prognóstico das LO, bem como contribuir na orientação sobre as decisões individuais de tratamento (AU)

• Processo FAPESP: 18/15728-3 - Associação de proteínas de vesículas extracelulares derivadas de fibroblastos com a progressão do Carcinoma Espinocelular Oral
• Beneficiário: Jamile de Oliveira Sá
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado