Estudo da encefalite causada por Usutu virus: estabelecimento de um modelo de infecção em camundongos e estudo da doença grave

Autor(es)

Rebeca de Paiva Froes Rocha

• Tipo de documento: Tese de Doutorado
• Imprenta: Campinas, SP.
• Instituição: Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Instituto de Biologia
• Data de defesa: 2022-11-16

Membros da banca

Rafael Elias Marques; José Luiz Proença Módena; Murilo de Carvalho; Luciana Barros de Arruda; Mauro Martins Teixeira

• Orientador: Rafael Elias Marques

Resumo

Encefalite é uma manifestação grave de doença neurológica que resulta em morte ou sequela nos sobreviventes. Estima-se que 60% de todos os casos não diagnosticados de encefalite sejam causados por infecções por vírus neurotrópicos. "Usutu virus" (USUV) é um vírus neurovirulento capaz de causar encefalite em humanos e outros vertebrados. A observação desse patógeno reclama maior atenção em razão do aumento da sua detecção em mosquitos e aves em toda a África e Europa Central e da falta de tratamentos ou vacinas específicas. Neste trabalho, estabelecemos um modelo de infecção por USUV em camundongos para caracterizar a doença e a inflamção resultante da infecção. Camundongos C57BL/6J (8-12 semanas de idade) foram infectados intracranialmente com 104 PFU de USUV. Os camundongos apresentaram sinais de doença neurológica, incluindo arqueamento das costas, paralisia e conjuntivite, e morte no dia 6 p.i.. No pico da doença, observamos aumento da carga viral e dos níveis de citocinas inflamatórias como CXCL1, CCL5, IFN-Y, IL-6 no cérebro, mas, não na periferiaA doença também foi caracterizada por infiltração de células na meninge e ativação da micróglia. Com o objetivo de identificar um medicamento antiviral eficaz contra a infecção por USUV, testamos o inibidor da polimerase viral, 7-Deaza-2'-C-Metiladenosina (7DMA). Camundongos knockout para o receptor de interferon tipo I (IFNAR-/-) foram infectados subcutaneamente com uma dose letal de USUV e tratados diariamente com a solução veículo ou 7DMA [50mg/kg] via gavagem por 6 dias após a infecção. Os camundongos tratados com 7DMA apresentaram mortalidade retardada quando comparados aos camundongos tratados com veículo. O tratamento também resultou na diminuição das cargas virais no cérebro, baço, fígado e soro. CCL5, CXCL-1 e IFNy estavam aumentados no baço, mas apenas CXCL-1 estava aumentado no cérebro. O tratamento foi capaz de diminuir os níveis de CXCL1 no cérebro durante os pontos iniciais da infecção, mas não no pico da doença. Em suma, fomos capazes de esclarecer algumas das características inflamatórias da infecção por USUV em camundongos adultos do tipo selvagem. Do ponto de vista das estratégias farmacológicas contra a infecção por USUV, o 7DMA reduziu eficientemente a carga viral e retardou a mortalidade em camundongos, indicando que as estratégias antivirais foram parcialmente protetoras contra a doença e que o 7DMA é uma droga promissora contra a infecção por USUV (AU)

• Processo FAPESP: 18/02594-9 - Estabelecimento de um modelo de infecção por usutu virus em camundongos: estudo da doença e teste de um composto neuroprotetor
• Beneficiário: Rebeca de Paiva Froes Rocha
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado