Ação do ácido undecilênico liberado por material reembasador sobre os biofilmes de Candida albicans ou Candida glabrata

Autor(es)

Letícia Machado Gonçalves

• Tipo de documento: Dissertação de Mestrado
• Imprenta: Piracicaba, SP.
• Instituição: Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Faculdade de Odontologia de Piracicaba
• Data de defesa: 2012-05-18

Membros da banca

Wander José da Silva; Fernanda Faot; Carlos Eduardo Vergani

• Orientador: Wander José da Silva

Resumo

Os materiais reembasadores para próteses dentais removíveis, após a exposição à cavidade bucal, apresentam alterações estruturais que facilitam a colonização por espécies de Candida. Neste contexto, o ácido undecilênico (AUD) tem sido incorporado na formulação deste material na tentativa de reduzir o desenvolvimento de biofilmes fúngicos. No entanto, concentrações de AUD liberadas pelo material reembasador e os efeitos destas sobre o desenvolvimento dos biofilmes de Candida ainda não foram elucidados. Por isso, a proposta deste estudo foi investigar a cinética de liberação do AUD a partir do material reembasador e avaliar o efeito deste sobre o desenvolvimento de biofilmes de C. albicans ou C. glabrata. Inicialmente, simulou-se in vitro a liberação do AUD na cavidade bucal através da imersão de corpos de prova de material reembasador (10 mm x 2 mm) em saliva artificial, sendo o produto da liberação quantificado através de cromatografia gasosa. Em seguida, a suscetibilidade de um isolado de referência e dois isolados clínicos de C. albicans (ATCC 90028, P01 e P34) e C. glabrata (ATCC 2001, P11 e P31) ao AUD foi investigada através da concentração inibitória mínima (CIM), concentração fungicida mínima (CFM) e tempo de morte celular (time-kill). Para avaliar o efeito do AUD sobre os biofilmes de Candida, películas de saliva foram formadas na superfície de corpos de prova de material reembasador contendo AUD (grupo experimental) ou não (controle) e, em seguida, biofilmes dos isolados citados foram formados sobre estas superfícies. Nos períodos de adesão, 24, 48 e 72 h de desenvolvimento dos biofilmes, foram realizadas análises de contagem celular através de diluição decimal seriada; de atividade metabólica através da redução mitocondrial do XTT; de estrutura dos biofilmes através da microscopia confocal a laser; e secreção enzimática de proteinases e fosfolipases através de métodos colorimétricos. Os dados foram submetidos à análise de variância seguida de teste de Tukey com nível de significância de 5%. As concentrações de AUD liberadas pelo material reembasador estavam dentro dos intervalos de CIM e CFM encontrados para todos os isolados avaliados. Pelo teste de time-kill foi possível observar que na CIM, o AUD teve ação fungistática por até 8 horas de exposição, para todos os isolados investigados. A presença de AUD não alterou a contagem celular, atividade metabólica, estrutura dos biofilmes e secreção enzimática nos estágios iniciais de colonização (adesão e 24 h) para ambas as espécies investigadas (p > 0.05). A exposição ao AUD resultou em menor contagem celular (p < 0.05) e atividade metabólica (p = 0.001) para os biofilmes maduros (48 e 72 h) de C. albicans, embora alterações estruturais e de secreção enzimática não foram identificadas (p > 0.05). Em contraste, biofilmes maduros de C. glabrata apresentaram maior quantidade de células (p = 0.004), atividade metabólica (p < 0.001) e secreção de proteinases no grupo experimental (p < 0.001). Considerando as limitações deste estudo, pôde-se concluir que a liberação de AUD pelo material reembasador não evitou a colonização de biofilmes de Candida (AU)

• Processo FAPESP: 10/12270-4 - Ação do ácido undecilênico liberado por material reembasador sobre a bioatividade, bioarquitetura e fatores de virulência do biofilme de Candida albicans e Candida glabrata
• Beneficiário: Letícia Machado Gonçalves
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado