Extração de proteinas em um sistema de duas fases aquosas numa micro-coluna pulsada

Autor(es)

Patricia Bernardi Leite

• Tipo de documento: Dissertação de Mestrado
• Imprenta: Campinas, SP.
• Instituição: Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Faculdade de Engenharia Química
• Data de defesa: 2001-03-15

Membros da banca

Elias Basile Tambourgi; Maria Elizabeth Brotto; Leila Peres

• Orientador: Elias Basile Tambourgi

Resumo

Os sistemas bifásicos aquosos têm sido largamente utilizados na pesquisa bioquímica para a separação e purificação de macromoléculas, células e partículas de origem celular. Nos últimos anos, os sistemas bifásicos também têm encontrado aplicações em diferentes áreas da biotecnologia, especialmente no que se refere a utilização de sistemas alternativos de baixo custo, como o sistema constituído por polissacarídeo da goma do cajueiro (POLI CAJU) e polietileno glicol (PEG). O exsudato de Anacardium occidentale L. consiste em um polissacarídeo ácido largamente encontrado no Nordeste brasileiro, onde é empregado como substituto da goma arábica para uso farmacêutico. A goma bruta foi coletada como exsudato natural de árvores cultivadas no estado de Pernambuco. Nódulos I ivres de cascas foram selecionados para o processo de isolamento da goma via precipitação por etanoI. Foram estabelecidos diagramas de fases para o sistema polissacarídeo da goma do cajueiro e polietileno glicol 1500,4000 e 8000 nos pH's 6,0, 7,0 e 8,0 para temperatura de 27 °C . Observou-se um deslocamento da binodal no sentido de maiores concentrações de polímeros com a diminuição do peso molecular do polietileno glicoI. A faixa de pH estudada, não acarretou alterações significativas na binodaI. Diferentes "tie-lines" foram analisadas para a determinação do coeficiente de partição de uma proteína modelo, a tripsina. A proteína se particionou predominantemente na fase inferior rica em POLI CAJU nas condições experimentais testadas. O aumento do comprimento da "tie-line" e do massa molar do polietileno glicol provocou, de modo geral, a redução do coeficiente de partição da tripsina. O coeficiente de partição não apresentou um comportamento regular com a variação da faixa de pH estudada. Em processamento contínuo, estudou-se o comportamento do sistema bifásico PEG­POLICAJU em coluna de campânulas pulsantes. O sistema selecionado para a transferência da tripsina da fase dispersa para a fase contínua foi o sistema obtido no processo em batelada: PEG 4000-POLlCAJU. Os estudos preliminares de transferência de tripsina numa coluna de campânulas pulsantes indicou que ocorreu uma recuperação de cerca de 40% de proteína na fase POLICAJU. (Condições: número de campânulas: 2; pulsação 1 :3; velocidade de pulsação: 2,0 mL/min) (AU)

• Processo FAPESP: 98/14801-3 - Extração de proteínas em sistema de duas fases aquosas numa microcoluna pulsada
• Beneficiário: Patricia Bernardi Leite
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado