Cisticercose: imunodiagnóstico, antígenos, resposta imunológica e aspectos clínico-epidemiológicos

Resumo

A neurocisticercose (NC), doença causada pela presença de cisticercos de Taenia solium no sistema nervoso central e pela complexa interação parasita-hospedeiro, é a forma de apresentação da cisticercose humana mais estudada devido à gravidade dos sintomas e elevadas morbidade e letalidade. A prevalência da doença é variável, estando diretamente relacionada a fatores sócio-econômico-culturais e representando importante problema de saúde publica em países com condições sanitárias deficientes, bem como em países industrializados que recebem imigrantes de áreas onde o complexo teníase-cisticercose tem caráter endêmico. O diagnóstico da NC é baseado em critérios clínicos, epidemiológicos e laboratoriais. Os métodos imunodiagnósticos, especialmente os ensaios imunoenzimáticos, empregando diferentes preparações antigênicas, representam ferramenta de grande utilidade e de custo acessível, que podem ser aplicados no diagnóstico e em estudos epidemiológicos. A obtenção de antígenos recombinantes e peptídeos sintéticos pode ser a solução para a fonte de antígenos e implementar a eficiência dos testes diagnósticos, interferindo nos índices de sensibilidade e especificidade, especialmente quando esses testes são aplicados em amostras de soros humanos e suínos. Ainda são consideradas áreas de contínuo interesse na investigação da NC: estudos abordando os mecanismos humorais e celulares envolvidos nos fenômenos imunobiológicos da relação parasita-hospedeiro durante as fases evolutivas do cisticerco e a validação de métodos imunológicos utilizando amostras de soro e antígenos que possam ser purificados, específicos e quantidade para aplicação em larga escala. Para melhor compreensão dos fenômenos imunobiológicos da relação parasita-hospedeiro e visando contribuir para elucidação dos mecanismos relacionados com as diferentes fases de evolução da patologia, os objetivos deste projeto são: estudar aspectos relacionados ao diagnóstico clínico-laboratorial, aspectos relativos à resposta imunológica celular e humoral envolvidos nos fenômenos dessa complexa relação parasita-hospedeiro, bem como dar continuidade à implementação dos estudos imunoquímicos de frações antigênicas na nossa linha de pesquisa.Para alcançarmos os objetivos deste estudo, propomos a produção e caracterização de anticorpos monoclonais; a produção e utilização de antígenos de excreção/secreção, purificados e recombinantes de cisticercos de T. crassiceps e T. solium, peptídeos sintéticos; desenvolvimento, padronização e aplicação de testes imunológicos para pesquisa de antígenos e anticorpos em amostras biológicas de pacientes com neurocisticercose, de animais de experimentação e de suínos infectados; e análise correlacionando aspectos clínicos, dados de neuroimagem e dados de outros marcadores laboratoriais. Para o estudo dos mecanismos relacionados com a resposta imune local (sistema nervoso central) e sistêmica estaremos avaliando a produção de anticorpos e a liberação de antígenos, caracterizando as células de defesa envolvidas e produção de citocinas em soro e LCR de pacientes com neurocisticercose. Como resultado deste projeto pretendemos implementar de forma sólida no Laboratório de Imunologia Clínica da FCF/USP a linha de pesquisa cisticercose iniciada em 1994; estabelecer e fortalecer a cooperação técnico-científica entre os pesquisadores das instituições envolvidas; a formação de recursos humanos nas Unidades participantes envolvendo alunos de graduação (iniciação científica), aperfeiçoamento e de pós-graduação, Mestrado e Doutorado e pós-doutorado; e a consecução dos objetivos específicos do projeto: obtenção e utilização de antígenos de excreção/secreção; purificação e caracterização de frações antigênicas por imunoafinidade; seqüenciamento dos peptídeos imunodominantes; obtenção de antígenos recombinantes; utilização de anticorpos monoclonais pesquisa e caracterização de antígenos na cisticercose humana e animal; desenvolvimento de testes rápidos para detecção de antígenos de cisticercos em LCR e de tênia em fezes humanas; desenvolvimento de testes rápidos de detecção de anticorpos; identificação de peptídeos responsáveis por resposta humoral de alta avidez; obtenção de dados soro-epidemiológicos em soros humanos e de suínos; seguimento de pacientes ao longo da evolução natural da doença, utilizando marcadores de imunidade celular e humoral, bem como a pesquisa de antígenos de cisticercos; e estudos de imunogenicidade em modelo experimental (camundongos-cisticercos de T. crassiceps). (AU)