Otimizacao de um metodo analitico para determinacao de calecolaminas presentes no aparelho reprodutor de ratos wistar e sprague-dawley simpatectomizados pela guanetidina, empregando hplc.

Resumo

A guanetidina é um agente bloqueador de neurônios noradrenérgicos que, se aplicada cronicamente em doses baixas (5 a 10 mg/kg/dia), afeta seletivamente neurônios "curtos" da genitália interna masculina do rato. Ratos Wistar e Sprague-Dawley tratados com a mesma dose (6,25 mg/kg, por 21días), apresentaram diferentes respostas quanto à performance reprodutiva. A variedade Sprague-Dawley se mostrou mais sensível, sendo incapaz de ejacular, enquanto que a Wistar ejaculou um número menor de espermatozóides. Mesmo assim, não se pode afirmar que os animais estão totalmente desnervados, e desta forma, não é garantido exatamente o impacto da desnervação sobre a contratilidade, afetando parâmetros reprodutivos e fertilidade dessas diferentes variedades de ratos. Este modelo experimental possui semelhanças com o que ocorre nos casos de lesão na medula espinhal na espécie humana, deste modo, considera-se de extrema importância a utilização do método de determinação de catecolaminas por HPLC desses animais. Os métodos analíticos relatados, na literatura especializada para a determinação de catecolaminas exigem a preparação da amostra através de extração e purificação das mesmas, antes de injetá-las no HPLC. O presente projeto de pesquisa propõe o emprego de uma coluna cromatográfica com superfície interna de fase reversa (ISRP-C18), que possibilitará a extração, separação e determinação das catecolaminas, por injeção do extrato das amostras de tecido no HPLC. (AU)