Especificidade e mecanismo de catálise das oligopeptidases neurolisina, timet oligopeptidase e neprilisina: estudos de cinética enzimática associados a mutações sítio-dirigidas

Resumo

A proteólise é vista atualmente como um mecanismo essencial nos processos biológicos, desde o desenvolvimento até o metabolismo. E o eventual desequilíbrio de vias proteolíticas tem clara implicação em doenças. As enzimas responsáveis pela proteólise são as peptidases (proteases ou proteinases), especializadas em catalisar a hidrólise de ligações peptídicas. Entre as peptidases, existem enzimas especializadas em degradar pequenos peptídeos (peptídeos contendo menos de 30 aminoácidos), denominadas oligopeptidases. O presente projeto de pesquisa tem como tema central o estudo das oligopeptidases timet oligopeptidase (TOP, EC 3.4.24.15), neurolisina (EC 3.4.24.16) e neprilisina (NEP, EC 3.4.24.11). Há estudos realizados sobre a especificidade das oligopeptidases, TOP, neurolisina e neprilisina. Para esses estudos tem sido fundamental o uso de substratos sintéticos com supressão intramolecular da fluorescência. Pretende-se agora empregar mutação sítio-dirigida em associação com substratos sintéticos com supressão intramolecular da fluorescência para investigar detalhes do mecanismo pelo qual as oligopeptidases atuam sobre seus substratos – uma etapa fundamental para o entendimento de suas funções nos organismos vivos, bem como para a geração futura de inibidores e substratos específicos. (AU)