Receptores muscarínicos em células de Sertoli de ratos: expressão e regulação dos receptores, sinalização intracelular e função

Resumo

Os resultados da literatura, incluindo os obtidos pelo nosso laboratório, mostraram que a neurotransmissão autonômica pode ter um papel na função das células testiculares. Com relação a importância do sistema nervoso parassimpático nas células de Sertoli há poucos relatos na literatura. Estudos imuno-histoquímicos detectaram a acetilcolinesterase no compartimento intersticial e peritubular do testículo de ratos nos estágios iniciais do desenvolvimento e nas células de Sertoli e germinativas durante a maturação sexual. Nosso laboratório mostrou a presença do RNA mensageiro para os cinco subtipos de receptores muscarínicos e estudos com o [3H]QNB detectou a presença dos receptores muscarínicos em células de Sertoli de ratos com 30 dias de idade. Estes receptores, quando ativados pelo carbacol, levaram a diminuição dos níveis de AMP cíclico induzido pelo foskolin, e ao aumento do fosfato de inositol total. Estes resultados, em conjunto, sugerem que a neurotransmissão colinérgica pode ter um papel fisiológico nas células de Sertoli. De fato, nosso laboratório mostrou o envolvimento da estimulação dos receptores muscarínicos com o aumento da ativação do fator de transcrição proteína ativadora-1 (AP-1) e com a proliferação celular, porém os subtipos de receptores e os mecanismos intracelulares envolvidos nestes efeitos ainda não foram esclarecidos. Além disso, a literatura tem sugerido que a ativação pelo carbacol da via da proteína quinase ativada por mitógenos, ERK1 /ERK2, leva a proliferação celular e a síntese protéica. As células de Sertoli secretam várias proteínas importantes no processo de espermatogênese, se o carbacol tem um papel na secreção protéica destas células precisa ainda ser determinado, assim como os mecanismos intracelulares envolvidos neste processo. Agonistas muscarinicos, esteroides, e fatores crescimento podem modular a expressão de receptores muscarínicos em diferentes tipos celulares. Nas células de Sertoli os fatores de crecimento e o carbacol têm uma importância na proliferação, diferenciação e expressão gênica e os receptores muscarínicos nestas células são regulados pelo próprio agonista, tornando-se interessante o estudo do efeito do EGF e bFGF na expressão dos subtipos de receptores muscarinicos nestas células. Desta forma, o objetivo deste estudo será caracterizar os subtipos de receptores muscarinicos presentes nas células de Sertoli de ratos e sua regulação pelos fatores de crescimento (EGF e bFGF). Será investigado o efeito do carbacol na síntese protéica e na expressão de proteínas secretadas por estas células, como testina, transferrina, alfa2-macroglobulina. Além disso, será estudado o envolvimento da via de sinalização intracelular, MAPK/ERK, nos efeitos observados após a estimulação destas células com o agonista muscarínico. Estes estudos poderão contribuir para um melhor entendimento dessa neurotransmissão em células de Sertoli e, consequentemente, no processo de (in)fertilidade masculina. (AU)