Inovação incremental no processo de seleção do sexo de espermatozoides bovinos por centrifugação em gradiente de densidade vidando facilitar a implementação em escala em empresas de congelação de sêmen e produção in vitro de embriões

Resumo

Constituem objetivos, inicialmente propostos, para o presente projeto: a) utilizar sistema de centrifugação com fluxo contínuo em gradiente contínuo de densidade, para produzir amostras de sêmen enriquecidas com espermatozoides portadores do cromossomo X; b) avaliar a eficiência deste sistema de centrifugação na sexagem de espermatozoides; c) avaliar a viabilidade dos espermatozoides sexados pela taxa de produção in vitro de embriões; d) verificar pela PCR o desvio na proporção sexual nos embriões produzidos in vitro com os espermatozoides centrifugados; e) Utilizar o DNA dos espermatozoides para amplificação dos genes SRY e XIST pela PCR em tempo real; f) comparar a eficiência de validação dos itens "d" e "e". Serão utilizadas amostras de sêmen congelado de bovinos de raças europeias e zebuínas serão centrifugadas em gradiente contínuo de densidade, e, posteriormente, utilizadas para produção in vitro de embriões. Será determinada a taxa de desenvolvimento in vitro de embriões bovinos. A validação dos resultados será feita pela PCR dos (embriões. Na tentativa de facilitar e tornar mais ágil o processo de validação dos resultados, o DNA dos espermatozoides será utilizado para amplificação e quantificação pela PCR em tempo real dos genes SRY e XIST o que permitirá verificar, logo após a centrifugação, se esta enriqueceu a amostra com espermatozoides X. (AU)