Estudo da expressao genica induzida por desintegrinas de venenos de serpentes visando a sua aplicacao nas terapias pro e anti-angiogenica.

Resumo

A interação de células tumorais com componentes da matriz extracelular (ECM) é mediada por diversos receptores de superfície incluindo as integrinas. Assim, substancias que bloqueiem a interação das células tumorais com as integrinas podem ter grande aplicação em terapia anti-metastática. Por outro lado, o crescimento tumoral é totalmente dependente do surgimento de novos vasos que alimentem o tumor. A neoangiogênese também é um processo dependente de integrinas. Desintegrinas são proteínas presentes em venenos de serpentes que bloqueiam especificamente a ligação da célula a componentes da matriz extracelular, impedindo assim a adesão. No entanto, a ligação da desintegrina à uma determinada integrina pode provocar a sua ativação e disparar eventos de sinalização que culminam com alteração de expressão gênica. Nosso grupo já vem trabalhando há vários anos no isolamento e caracterização de novas desintegrinas de venenos bem como na clonagem e expressão de desintegrinas recombinantes. Visando o potencial de aplicação clínica das desintegrinas, este projeto tem como objetivos: 1) Aprofundar os estudos de relação estrutura-atividade, tendo em vista as diferentes desintegrinas disponíveis em nosso laboratório; 2) Investigar as alterações de expressão gênica induzida pelas diferentes classes de desintegrinas; 3) Buscar novas alternativas de aplicação destas proteínas, à luz dos resultados já obtidos. Para atingir estes objetivos, serão utilizadas desintegrinas nativas e recombinantes, purificadas em nosso laboratório. Serão feitos ensaios de adesão e inibição de adesão de diversos tipos celulares in vitro, por fluorimetria. A análise da expressão gênica será feita por RT-PCR em tempo real. Desta forma, esperamos entender as vias de sinalização disparadas pela adesão das células a estas proteínas e os eventos celulares resultantes desta ligação. (AU)