Expressão gênica durante o sono após exposição a um ambiente enriquecido

Resumo

A relação entre sono e aprendizado é comprovada por experimentos eletrofisiológicos e comportamentais. No entanto os mecanismos moleculares que governam esta relação ainda não estão claros. Durante o sono de ondas lentas (OL) genes de expressão imediata relacionados à plasticidade tem expressão reduzida. No entanto, durante o sono REM (REM) genes como Zif-268 e Arc apresentam um aumento no nível de expressão no córtex cerebral e hipocampo de animais previamente expostos a informações novas durante a vigília. Portanto o objetivo do presente projeto é analisar o perfil de expressão gênica durante as fases do sono após a exposição a um ambiente enriquecido. Os potenciais de campo hipocampais serão registrados em ratos machos adultos antes, durante e depois da exposição ao ambiente enriquecido. Este consiste de quatro objetos novos desenhados para maximizar diferenças táteis e comportamentais colocados na caixa de registro. Após a exposição os animais serão privados de sono por 60 minutos e então serão liberados para dormir enquanto o comportamento e os potenciais de campo serão registrados. Trinta minutos após entrarem no estágio de sono a ser analisado os animais serão sacrificados e amostras dos córtices somestésico primário (S1), visual primário (V1) e hipocampo (HP) serão dissecadas e congeladas. Um screening inicial será realizado no HP por análise serial de expressão gênica (SAGE). A partir dos resultados obtidos por SAGE, serão selecionados os genes com expressão diferencial mais significativa (menor p) entre os dois grupos. Os níveis de expressão desses genes serão analisados individualmente por PCR em tempo real (qRT-PCR). (AU)