Efeito da inativação de genes regulatórios e da exposição a macrófagos murinos na expressão de glucosiltransferases B e C e de glucan-binding protein B em isolados de Streptococcus mutans

Resumo

Streptococcus mutans, principal patógeno da cárie dental, se acumula no biofilme dentário através da produção de matriz extracelular de polissacarídeos insolúveis a partir da sacarose (glucanos), que são catalisados pelas enzimas glucosiltransferases B e C. Embora por mecanismos ainda pouco compreendidos, a interação bacteriana com a matriz de glucanos parece envolver proteínas ligantes de glucanos (Gbps). Tais proteínas têm sido aplicadas como antígenos alvos em estudos que visam desenvolver vacinas anti-cárie. Evidências recentes em cepas laboratoriais suportam que a expressão dos genes gtfB/C e gbpB é regulada por sistemas de regulação de transcrição de dois componentes (SDC). Recentemente demonstramos em diversos genótipos de S. mutans que padrões de transcrição de gbpB, gtfB e gtfC são cepa-específicos, assim como alguns dos seus diversos genes reguladores, como covR e vicR (Stipp et al., 2006). Estes resultados demonstram que mecanismos de virulência analisados em único genótipo não podem ser aplicados a toda a espécie. Estudos em Streptococcus pneumoniae corroboram este conceito, uma vez que a inativação de genes de um mesmo SDC gerou fenótipos de virulência específica dependentes da cepa estudada. O presente projeto visa comparar o efeito da inativação de dois genes regulatórios de SDC, que aparentemente controlam os genes de virulência gffB, gtfC e gbpB, em mutantes knockout obtidos a partir de 4 diferentes genótipos clínicos de S. mutans. Os mutantes serão comparados quanto às atividades de transcrição de gtfB/C e gbpB e com relação ao reconhecimento e internalização por macrófagos murinos, em uma das mais bem caracterizadas linhagem de células apresentadoras de antígenos bacterianos. (AU)