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Efeito da pre maturacao sobre o desenvolvimento embrionario de oocitos submetidos a ativacao partenogenetica e transferencia de nucleo.

Processo: 06/58536-0
Modalidade de apoio:Bolsas no Brasil - Mestrado
Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2007
Data de Término da vigência: 30 de junho de 2009
Área de conhecimento:Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
Pesquisador responsável:Cláudia Lima Verde Leal
Beneficiário:Tiago Henrique Camara De Bem
Instituição Sede: Faculdade de Zootecnia e Engenharia de Alimentos (FZEA). Universidade de São Paulo (USP). Pirassununga , SP, Brasil
Assunto(s):Bovinos   Fator neurotrófico derivado do encéfalo   Transferência nuclear   Oócitos
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:Bdnf | Bovino | Butirolactona I | Oocito | Pre Maturacao | Transferencia Nuclear

Resumo

A crescente busca por rebanhos geneticamente superiores proporcionou um grande avanço nas biotécnicas de reprodução animal, mas mesmo com toda melhoria na produção in vitro de embriões (PIV), as taxas de desenvolvimento embrionário estão aquém do esperado. Esta baixa produção pode estar relacionada com as condições da maturação in vitro (MIV) dos oócitos. O presente estudo tem por objetivo otimizar a competência de oócitos bovinos, visando seu uso na biotécnica de transferência nuclear (TN). No experimento 1 os oócitos serão submetidos à MIV na presença ou não de BDNF. No experimento 2 será avaliada a pré-maturação de oócitos bloqueados comBLI na presença ou não de BDNF. Após 24h de bloqueio os oócitos serão transferidos para o meio de maturação (20h) e, em seguida, serão submetidos à ativação partenogenética com ionomicina e 6-DMAP. O grupo que apresentar melhores taxas de embriões após ativação será utilizado na TN. Para a TN os ovócitos serão bloqueados (24h) e maturados (20h) ou somente maturados (controle, 20h) nas melhores condições definidas nos experimento 1 e 2. Os oócitos maturados dos 2 grupos que apresentarem extrusão do 1o corpúsculo polar serão usados na técnica de TN (enucleação, reconstrução, eletrofusão e ativação), e posteriormente transferidos para o cultivo em meio SOF por 7 dias para avaliação da taxa blastocistos, sendo estes fixados em paraformaldeído para posterior análise da fragmentação do DNA dos embriões através da técnica de TÚNEL. (AU)

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Publicações científicas
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
DE BEM, TIAGO H. C.; CHIARATTI, MARCOS R.; ROCHETTI, RAQUEL; BRESSAN, FABIANA F.; SANGALLI, JULIANO R.; MIRANDA, MOYSES S.; PIRES, PEDRO R. L.; SCHWARTZ, KATIA R. L.; SAMPAIO, RAFAEL V.; FANTINATO-NETO, PAULO; et al. Viable Calves Produced by Somatic Cell Nuclear Transfer Using Meiotic-Blocked Oocytes. CELLULAR REPROGRAMMING, v. 13, n. 5, p. 419-429, . (06/58536-0, 05/59694-5)
ADONA, P. R.; DE BEM, T. H. C.; MESQUITA, L. G.; ROCHETTI, R. C.; LEAL, C. L. V.. Embryonic Development and Gene Expression in Oocytes Cultured In Vitro in Supplemented Pre-Maturation and Maturation Media. REPRODUCTION IN DOMESTIC ANIMALS, v. 46, n. 1, p. e31-e38, . (06/58536-0, 08/50900-0, 05/59694-5, 07/57883-0)
DE BEM, T. H. C.; ADONA, P. R.; BRESSAN, F. F.; MESQUITA, L. G.; CHIARATTI, M. R.; MEIRELLES, F. V.; LEAL, C. L. V.. The Influence of Morphology, Follicle Size and Bcl-2 and Bax Transcripts on the Developmental Competence of Bovine Oocytes. REPRODUCTION IN DOMESTIC ANIMALS, v. 49, n. 4, p. 576-583, . (06/58536-0, 05/59694-5)
Publicações acadêmicas
(Referências obtidas automaticamente das Instituições de Ensino e Pesquisa do Estado de São Paulo)
BEM, Tiago Henrique Camara De. Efeito da pré-maturação sobre o desenvolvimento embrionário de oócitos submetidos à ativação partenogenética e transferência de núcleo. 2009. Dissertação de Mestrado - Universidade de São Paulo (USP). Faculdade de Zootecnica e Engenharia de Alimentos (FZE/BT) Pirassununga.