Caracterização funcional de fatores de transcrição envolvidos na regulação do metabolismo do glicogênio em Neurospora crassa

Resumo

O presente projeto tem como objetivo principal a caracterização funcional de fatores de transcrição que possivelmente estão envolvidos com a regulação do metabolismo do glicogênio utilizando como organismo modelo o fungo Neurospora crassa. Em condições normais de crescimento este fungo acumula glicogênio no final da fase exponencial e degrada o carboidrato no início da fase estacionária. Em uma situação de estresse, tal como choque térmico (transferência de 30 para 45ºC), é bem conhecido que o fungo degrada glicogênio, um comportamento inverso ao que é descrito na levedura Saccharomyces cerevisiae na mesma situação de estresse. Resultados prévios de nosso laboratório mostraram que, na condição de estresse térmico, a transcrição do gene gsn que codifica a enzima glicogênio sintase (enzima regulatória da via de síntese) é severamente reduzida e recuperada quando o fungo retorna à temperatura normal de crescimento (30ºC). Na tentativa de compreender os mecanismos moleculares envolvidos na regulação da transcrição do gene gsn a seqüência genômica do gene, bem como de sua região promotora foram identificadas e analisadas. Foi observado que proteínas nucleares são capazes de reconhecer e ligar a seqüências do promotor contendo os elementos de DNA regulatórios HSE e STRE e experimentos visando a identificação destas proteínas estão sendo conduzidos no laboratório. Paralelamente, com a finalização do genoma do fungo linhagens mutantes em fatores de transcrição foram disponibilizadas pelo FGSC (Fungal Genetics Stock Center, Missouri, USA). A utilização destas linhagens para uma análise sistemática visando a identificação de quais fatores de transcrição estariam participando dos mecanismos moleculares envolvidos na regulação do metabolismo de glicogênio na situação estudada é altamente promissora, e abre novas perspectivas de estudo para o laboratório.