Construção de uma biblioteca de cDNA dos tentáculos da anêmona do mar Bunodosoma cangicum e clonagem de neurotoxinas

Resumo

Como as anêmonas do mar são organismos sésseis, usam um aparato peçonhento (localizado preferencialmente em seus tentáculos) para produzir e inocular toxinas paralisantes em suas presas ou para defender-se. A maioria das toxinas são peptídeos, de cerca de 2 a 5 kDa, que interagem com canais iônicos. Algumas dessas toxinas já foram isoladas e identificadas a partir da peçonha da espécie Bunodosoma cangicum pelo candidato, durante seu doutoramento. Neste projeto, pretendemos (1) construir uma biblioteca de cDNA dos tentáculos desses animais e desenharmos "primers", com base em seqüências primárias parciais, para identificar e clonar as seqüências completas das principais famílias de toxinas; (2) fazer o seqüenciamento aleatório de outros clones obtidos para ampliar o repertório de toxinas produzidas por esses animais. A diversidade de peptídeos existentes na peçonha desses animais revela que existem famílias de toxinas que interagem com canais de sódio, de potássio e outros grupos, cujos alvos farmacológicos ainda são desconhecidos. Conseqüentemente, através desta abordagem molecular, pretendemos cobrir amplamente o repertório tóxico produzido pela anêmona Bunodosoma cangicum. (AU)