A ação da progesterona nos neurônios GnRH é mediada pelo locus coeruleus? Um estudo por microdiálise

Resumo

O ciclo estral de ratas é caracterizado pela ocorrência dos picos pré-ovulatórios de gonadotrofinas na tarde do proestro e os esteroides ovarianos exercem um importante papel na gênese desses picos. A noradrenalina (NA) do locus coeruleus (LC) parece ter papel fundamental na modulação desse controle pelos esteroides gonadais. Visto que o LC envia projeções para áreas envolvidas com a síntese (área pré-óptica - APO) e liberação (eminência mediana - EM) de GnRH, que os neurônios deste núcleo estão sob a modulação dos esteroides ovarianos, que esses esteroides induzem síntese de GnRH nos neurônios da área pré-óptica mediai (APOM), e que o aumento da expressão de GnRH induzido pela progesterona parece ser mediado pela noradrenalina produzida pelo LC, este projeto se propõe a avaliar, por meio de microdiálise in vivo: 1) o efeito dos esteroides ovarianos na liberação de GnRH no HMB de ratas ovariectomizadas; e 2) o efeito da micro injeção no LC de antagonista de receptor de progesterona sobre a liberação de GnRH. Um terceiro experimento é proposto com o objetivo de avaliar, por meio de hibridização in situ, o efeito da micro injeção no LC de antagonista de receptor de progesterona sobre a síntese de GnRH na APO. No experimento 1, ratas ovariectomizadas (OV) serão tratadas com óleo ou estradiol, associado ou não à progesterona. Os animais terão uma cânula guia implantada no hipotálamo médio basal (HMB), após 6 dias, serão submetidas à canulação da veia jugular; o probe de microdiálise será adaptado e o dialisado coletado a cada 1 h das 11 às 18 h para posterior dosagem de GnRH no HMB. Coletas de sangue serão realizadas às 11, 14, 15, 16, 17 e 18 h para dosagem de LH no plasma. No experimento 2, será utilizado o mesmo protocolo experimental, com exceção de que os grupos a serem analisados serão selecionados conforme os resultados do experimento 1 e, nesses grupos, além da cânula guia no HMB para o probe de microdiálise, será colocada outra no LC para micro injeção de RU 486. No experimento 3, ratas OV serão tratadas com óleo ou estradiol, associado ou não à progesterona. Uma cânula guia será implantada no LC para a micro injeção com RU 486. Todos os animais serão decapitados após a última injeção de óleo ou hormônio, nos seguintes horários: 11h, 13h, 15h, 17h e 19h. Os cérebros serão removidos, e a expressão do gene para GnRH será avaliada em cortes contendo neurônios da APO por meio da técnica de hibridização in situ. (AU)