Estudo do envolvimento dos proteoglicanos na interacao entre celulas tumorais e estromais na formacao do tumor coloretal e de prostata

Resumo

Os fatores que controlam a progressão tumoral envolvem, entre outros, a relação entre as células neoplásicas invasoras e o seu estroma. Evidências recentes indicam que as células tumorais influenciam as estromais e vice-versa, através do contato direto célula-célula, e também na produção de componentes da matriz. O presente projeto visa estudar os proteoglicanos envolvidos nessa interação, utilizando-se de células em cultura, e também tecidos tumorais, coloretais e de próstata. O estudo dará ênfase aos proteoglicanos pequenos, ricos em leucina, mais especificamente o Lumicam, e também o Versicam, o principal proteoglicano sintetizado pelos fibroblastos de estroma. Utilizaremos linhagens celulares coloretais, Caco-2 e HCT 116, com agressividades metastáticas crescentes, e de próstata PC3. Além disso, cortes histológicos de tecidos tumorais também serão utilizados. Os proteoglicanos serão investigados pela utilização de anticorpos específicos, e co-localização subcelular por Microscopia confocal. O refinamento estrutural da parte açúcar desses compostos será estudado por marcação com radioisótopos, seguido por utilização de enzimas específicas e identificação por cromatografia em papel e cromatografia líquida de alta pressão (HPLC). Ainda, usando a técnica do PCR em Tempo Real pretendemos quantificar a expressão desses proteoglicanos nas diferentes células, e após a interação com fibroblastos, a matriz estromal ou o seu meio condicionado. O estudo tem a finalidade de compreender as interações entre células tumorais e estromais, bem como os efeitos parácrinos e autócrinos que levam à síntese alterada dos proteoglicanos. (AU)