Efeito de polimorfismos e de origem parental sobre a diferenciação celular in vitro, a expressão e a epigenética em genes de interesse comercial em bovinos de corte

Resumo

Neste projeto, buscamos avaliar os efeitos de polimorfismos e da origem parental do alelo sobre a diferenciação celular in vitro, a expressão gênica e as modificações epigenéticas em genes associados a características de interesse econômico, como maciez da carne e deposição de gordura, em bovinos de corte. Para tanto, úteros gravídicos serão coletados em abatedouro, e amostras de tecido materno e fetal serão utilizadas para a genotipagem dos animais e avaliação de polimorfismos de nucleotídeo único (SNP) em regiões codificadoras dos genes calpaína, calpastatina, DGAT1 e leptina. Posteriormente, células precursoras de mioblastos e adipócitos oriundas, respectivamente, de músculo e tecido adiposo de fetos homozigotos e de heterozigotos, filhos de mães homozigotas para tais SNP, serão submetidas ao cultivo in vitro e avaliadas após indução de diferenciação. Além disso, a expressão gênica será analisada antes do cultivo, após a diferenciação e após o tratamento com agentes que promovem modificações epigenéticas. Em músculo, tecido adiposo e fígado dos fetos heterozigotos, o alelo expresso e a sua origem serão determinados por discriminação alélica em PCR em tempo real. A avaliação das modificações epigenéticas, por imunoprecipitação da cromatina (ChIP) com anticorpos para DNA metilado e histona acetilada e metilada, será feita para o gene que apresentar maior expressão diferencial entre tecidos, alelos e origem. Assim, buscamos aumentar a compreensão dos eventos que controlam a expressão de genes de interesse comercial em bovinos de corte, de maneira a buscar estratégias para sua modificação e a permitir a incorporação de outros critérios na seleção assistida por marcadores genéticos, visando à melhoria de características de carcaça e da qualidade da carne bovina. (AU)