Extração de DNA e amplificação de genes plastidiais de cactaceas do grupo de espécies Pilosocereus aurisetus

Resumo

Estudos filogeográficos são dependentes da obtenção de amostras de DNA de boa qualidade, bem como da amplificação de genes neutros que apresentem elevada variação. Para a realização de estudos filogeográficos em cactáceas, por exemplo, é necessário inicialmente superar as dificuldades verificadas na obtenção de amostras de DNA, pois a elevada quantidade de polissacarídeos e metabólitos secundários nos tecidos dessas plantas provoca a formação de complexos insolúveis com o ácido nucléico, prejudicando seu isolamento. Outra dificuldade a ser superada nos estudos com cactáceas é a baixa quantidade de variação encontrada nos genes do cloroplasto, os quais geralmente são utilizados em estudos filogeográficos de espécies vegetais. Assim, é necessário localizar e padronizar a amplificação de segmentos gênicos do cloroplasto com taxa de evolução elevada, adequada ao nível taxonômico abordado. O objetivo deste projeto é estabelecer um procedimento padronizado de extração de DNA de quatro espécies de cactáceas do grupo Pilosocereus aurisetus e realizar um estudo piloto para a escolha do segmento gênico no genoma do cloroplasto com base no nível de variação populacional verificado. (AU)