Translocacao pigmentar em cromatoforos ovarianos do camarao de agua-doce macrobrachium olfersi (crustacea, decapoda): do receptor aos motores moleculares.

Resumo

A translocação pigmentar em cromatóforos de crustáceos é um modelo excelente para compreender complexas cascatas de sinalização intracelular. Nosso laboratório emprega como modelo os cromatóforos ovarianos do camarão de água-doce Macrobrachium olfersi; já identificamos Ca2+ e GMP cíclico como importantes elementos da cascata de sinalização envolvida na translocação pigmentar. No entanto, desconhece-se a natureza do receptor do hormônio agregador de pigmento vermelho (RPCH), localizado na membrana plasmática. Pouco se sabe também dos efetuadores ativados pelo GMPc, como a proteína cinase G (PKG) e outras cinases e fosfatases que regulam a atividade dos motores moleculares, como a miosina e a cinesina, envolvidos respectivamente na agregação e na dispersão pigmentar. Ainda, desconhecem-se as classes específicas de miosina que efetuam a translocação pigmentar. Propusemos aqui investigar se o receptor do RPCH é do tipo acoplado à proteína G (GPCR) e avaliar o papel de cinases na transdução de sinal, bem como o tipo de miosina envolvida na agregação pigmentar. Assim, em uma preparação in vitro, perfundindo cromatóforos ovarianos, pretendemos estimular o sinal gerado por GPCRs, inibindo a formação do complexo proteína RGS/G*α (Gsα, Giα ou Gqα) com os compostos BMS-195270 e CCG-4986; inibir a PKG com RP-CGMPS-triethylamine; a cinase da cadeia leve da miosina (MLCK), com ML-7; a miosina fosfatase (MLCP), com cantharidin; e a miosina II não-muscular, com beblistatina. Pretendemos assim realizar a integração de importantes passos desta cascata de sinalização, de seu receptor a seus efetuadores. (AU)