Consolidação do Centro de Microscopia Funcional do Campus da USP/ Ribeirão Preto

Resumo

Miosina V é uma mecanoenzima envolvida no transporte e ancoragem de vesículas e organelas, incluindo vesículas sinápticas, mitocôndria, reticulo endoplasmático liso, melanossomos e endossomos. Além das funções relacionadas ao transporte de organelas, outras funções vêm recebendo destaque especial por estarem envolvidas em vias centrais da fisiologia celular, conforme exposto neste projeto. Esta diversidade funcional tem como base sua estrutura molecular complexo, composto de três domínios funcionais, e um capacidade de interagir com vários parceiros moleculares. O objetivo geral do nosso projeto de pesquisa e determinar as propriedades e atividades dos domínios da miosina V e integrar esta Informação no entendimento de sua função celular. Portanto, aplicamos múltiplas abordagens, inclusive purificação e análises de proteínas por técnicas bioquímicas, técnicas de DNA recombinante e expressão heteróloga, engenharia molecular de células em cultura, microscopia de fluorescência e eletrônica, imunodetecção, imunodetecção, imunoprecipitação, pull-down e espectnometria de massa. No presente projeto, acrescentamos a proposta de utilizar técnicas atuais de imagens fluorescentes de células vivas, como FRET e FRAP, para o estudo das interações e dinâmica da miosina V e proteínas associadas. (AU)