A DiCre recombinase-based system for inducible expression in Leishmania major

Autor(es)

Santos, Renato E. R. S. ^[1] ; Silva, Gabriel L. A. ^[1] ; Santos, Elaine V. ^[1] ; Duncan, Samuel M. ^[2] ; Mottram, Jeremy C. ^{[2, 3]} ; Damasceno, Jeziel D. ^[1] ; Tosi, Luiz R. O. ^[1]

Afiliação do(s) autor(es)

^[1] Univ Sao Paulo, Dept Cell & Mol Biol, Ribeirao Preto Med Sch, Ribeirao Preto, SP - Brazil

^[2] Univ Glasgow, Inst Infect Immun & Inflammat, Wellcome Ctr Mol Parasitol, Glasgow, Lanark - Scotland

^[3] Univ York, Dept Biol, Ctr Immunol & Infect, York, N Yorkshire - England

• Tipo de documento: Artigo Científico
• Fonte: Molecular and Biochemical Parasitology; v. 216, p. 45-48, SEP 2017.
• Citações Web of Science: 4

Resumo

Here we present the establishment of an inducible system based on the dimerizable Cre recombinase (DiCre) for controlled gene expression in the protozoan parasite Leishmania. Rapamycin-induced DiCre activation promoted efficient flipping and expression of gene products in a time and dose-dependent manner. The DiCre flipping activity induced the expression of target genes from both integrated and episomal contexts broadening the applicability of the system. We validated the system by inducing the expression of both full length and truncated forms of the checkpoint protein Rad9, which revealed that the highly divergent C-terminal domain of Rad9 is necessary for proper subcellular localization. Thus, by establishing the DiCre-based inducible system we have created and validated a robust new tool for assessing gene function in Leishmania. (AU)

• Processo FAPESP: 09/54014-7 - EMU: aquisição dos equipamentos IVIS Spectrum e microscópio de excitação por dois fótons para imagem in vivo
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• Linha de fomento: Auxílio à Pesquisa - Programa Equipamentos Multiusuários
• Processo FAPESP: 14/00751-9 - Identificação de proteínas que interagem com LmRad9, LmHus1 e LmRad1 e geração de linhagem de nocaute condicional para LmHus1
• Beneficiário: Jeziel Dener Damasceno
• Linha de fomento: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Pós-Doutorado
• Processo FAPESP: 04/08868-0 - Consolidação do Centro de Microscopia Funcional do Campus da USP/ Ribeirão Preto
• Beneficiário: Roy Edward Larson
• Linha de fomento: Auxílio à Pesquisa - Programa Equipamentos Multiusuários
• Processo FAPESP: 13/00570-1 - Caracterização do possível complexo 9-1-1 de Leishmania major
• Beneficiário: Jeziel Dener Damasceno
• Linha de fomento: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
• Processo FAPESP: 14/06824-8 - Caracterização das proteínas LmRad9 e LmRad1 na resposta a danos no DNA de Leishmania major
• Beneficiário: Luiz Ricardo Orsini Tosi
• Linha de fomento: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Processo FAPESP: 13/26806-1 - Caracterização da proteína LmRad1 de Leishmania major e estudo de seu papel na sinalização de danos no DNA
• Beneficiário: Elaine Vieira Santos
• Linha de fomento: Bolsas no Brasil - Doutorado