Alterações epigenéticas como biomarcadores em câncer de cabeça e pescoço

Resumo

A ativação de protoncogenes e a inativação de genes supressores tumorais são as principais alterações genéticas envolvidas na carcinogênese. Dentre os principais mecanismos de alterações epigenéticas estão a metilação do DNA, o imprinting genômico e a modificação das proteínas histonas da cromatina. Padrões alterados de metilação do DNA são encontrados em diversas doenças, especialmente no câncer, onde ocorre uma perda do controle de metilação do DNA. O aumento da metilação na região promotora de um gene supressor tumoral pode levar a redução progressiva da sua expressão, resultando no silenciamento do mesmo e na seleção de células com vantagem proliferativa. Análises realizadas nos padrões de metilação do DNA mostram que este processo pode ser usado como biomarcador de diagnóstico precoce, assim como para classificação, prognóstico e terapias dos cânceres humanos. Assim, a avaliação de alterações epigenéticas, tais como a metilação do DNA, seria útil como ferramenta no diagnóstico, prognóstico e prevenção do câncer. Este projeto tem como objetivo identificar e caracterizar padrões de metilação que possam predizer prognóstico e/ou estar envolvidos com a progressão do câncer de cabeça e pescoço. Para isso, serão utilizados os métodos de análise do perfil de metilação de DNA (tratamento com bissulfito de sódio, purificação do DNA tratado com bissulfito, amplificação das regiões de interesse via QMSP-PCR) e reação de pirosequenciamento. Serão criados oligonucleotídeos específicos para analisar metilação, tendo como alvo inicial um grupo de 13 genes (MGMT; DAPK1; DCC; CDKN2A (P16); CDH1; AIM1; CCNA1; HIC1; RASSF5; MST1; LATS1; LATS2 e TIMP3). Serão utilizados: programa estatístico SPSS, testes qui-quadrado ou t de Student, teste exato de Fischer e Kaplan-Meier.