Efeitos da MMP-2 recombinante em vasos ateroscleróticos in vitro e avaliação da morfologia e função de artérias, bem como potencial de difusão para outros orgãos

Resumo

Atualmente, a aterosclerose é a principal causa de infarto no mundo e a MMP-2 é uma das proteases mais importantes nessa doença, pois está relacionada com ruptura da placas ateroscleróticas. Vários trabalhos na literatura têm demonstrado que inibidores que atuam sobre a MMP-2 são benéficos em doenças cardiovasculares. No entanto, até o presente momento, poucos estudos mostraram os efeitos diretos da ação dessa protease em vasos. Ainda não se sabe, por exemplo, se esta protease deixa o compartimento vascular e se difunde para dentro das paredes dos vasos e para certos órgãos alvo que são tipicamente lesados em doenças cardiovasculares. A presente proposta prevê a clonagem, expressão e purificação do domínio catalítico da Metaloproteinase da Matriz 2 (MMP-2) recombinante humana fusionada com o gene que codifica para o repórter fluorescente GFP (proteína verde fluorescente), com a finalidade de mapear diretamente o destino desta molécula circulante, assim como seu envolvimento em processos de lesão em órgãos alvo em modelos de aterosclerose. Esse projeto prevê dois modelos de aterosclerose. Na primeira etapa, será estudada a atividade proteolítica, função e difusão da MMP-2 recombinante em aortas de coelho com aterosclerose. Na segunda etapa, a MMP-2 será colocada em bombas de infusão, que serão implantadas nos camudongos com aterosclerose (LDLr-/-), sendo assim liberada por 4 semanas. Após este período serão avaliadas as modificações morfológicas e funcionais de artérias, assim como o destino da MMP-2 fluorescente in vivo, principalmente observando-se as artérias, o coração e rim. (AU)